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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
40
- 英文名:
Annexin V-EGFP Reagent
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
100μl(20T)
英文名称:Annexin V-EGFP Reagent
产品规格:100μl(20T)
发货周期:1~3天
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。
Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素(EGFP)标记,以标记了的Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。
注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP 避光保存及使用。
3. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
4. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
5. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
6. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
储存:-20℃避光,有效期12个月。
EGFP标记Annexin V 使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
ERG polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse测试范围:WB; IHC包装:100 ul
GSR polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC包装:100 ul
HSP90B1 polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC包装:100 ul
CALR polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC包装:100 ul
GRK4 polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:WB; IHC包装:100 ul
GREM1 polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB包装:100 ul
GZMB polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:IHC包装:100 ul
GRB7 polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:IHC包装:100 ul
GPC6 polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse测试范围:IHC包装:100 ul
GPA33 polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:WB; IHC包装:100 ul
CSF2RA polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:WB包装:100 ul
GLP2R polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse测试范围:WB; IHC包装:100 ul
UGCG polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC包装:100 ul
GAS7 polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC包装:100 ul
LGALS2 polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse测试范围:WB; IHC包装:100 ul
Carprofen 卡洛芬(标准品) 质量规格:>96%,美国进口
Catharanthine 长春质碱(标准品) 质量规格:>96%,原装进口
Albendazole 阿苯达唑(标准品) 质量规格:>96.0%(GC)
Albendazole 阿苯达唑 质量规格:>96.0%(GC)
Cerivastatinsodium 西立伐他汀钠 质量规格:>96.0%(GC)
Cetirizine2HCl 西替利嗪 质量规格:>96.0%(GC)
CetrorelixAcetate 醋酸西曲瑞克 质量规格:>96.0%(GC)
Chelerythrine 白屈菜红碱 质量规格:>96.0%(GC)
ChlorhexidineAcatate 醋酸氯己定 质量规格:>96.0%(GC)
Fluvastatinsodiumsalt 氟伐他汀钠 质量规格:>96.0%(GC)
Fluvastatinsodiumsalt 氟伐他汀钠(标准品) 质量规格:>96.0%(GC)
Clinafloxacin 克林沙星 质量规格:>96.0%(GC)
LevamisoleHCl 盐酸左旋咪唑 质量规格:>96.0%(GC)
LevamisoleHCl 盐酸左旋咪唑(标准品) 质量规格:>96.0%(GC)
ClomipramineHCL 盐酸氯米帕明/盐酸氯丙咪嗪 质量规格:>96.0%(GC)
EGFP标记Annexin V 中文名称 RecQ解旋酶样蛋白5抗体
别 名 ATP-dependent DNA helicase Q5; DNA helicase, RecQ like type 5; DNA helicase, RECQ-like, type 5; RecQ helicase protein-like 5 beta; RecQ protein-like 5; RecQ protein-like 5, isoform CRA_b; RecQ5; Recq5b; Recql5b; RECQ5_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow
产品类型 一抗
研究领域 染色质和核信号 表观遗传学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 109kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RECQL5
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
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文献和实验Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin-V进行荧光素(FITC、PE)或biotin标记,以标记了的Annexin-V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸
Annexin-V-FLUOS 和PI双标记法检测细胞凋亡 凋亡早期,细胞表面可发生改变,细胞膜的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从胞膜内转移到胞膜外层,从而使PS暴露在细胞表面。在凋亡发生时,巨噬细胞能特异性识别暴露在细胞表面的PS,从而吞噬凋亡细胞和凋亡小体,使机体免于细胞内容物释出所引起的炎症反应和伴有的组织细胞坏死。Annexin-V 是一种Ca2+依赖性的磷脂结合蛋白,与PS有高度亲和力。因此该蛋白可以作为一种敏感的探针,用以检测暴露在细胞膜外层
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