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47
- 英文名:
Prestained Protein Marker(20~110kDa) For Western Blot
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
100μl(20~50T)
英文名称:Prestained Protein Marker(20~110kDa) For Western Blot
产品规格:100μl(20~50T)
发货周期:1~3天
本制品是专门为Western Blot试验设计的分子量标准。传统的Western Blot 试验需要使用预染蛋白Marker来跟踪检测阳性抗原信号和转膜效率。 但预染蛋白Marker无法在胶片上曝光,曝光信号需要根据膜上的预染蛋白Marker来判断,另外预染蛋白Marker都经过化学修饰,经过化学修饰的蛋白在SDS-PAGE 电泳过程中迁移率发生改变,分子量信息不再准确,往往导致Western Blot 结果判断出现较大偏差。
我司Western Blot Marker由7种不同分子量的蛋白组成(19、20、35、45、60、65、110 KDa), 其中19、45 、65KDa三条带为蓝色预染蛋白,用于SDS-PAGE胶电泳时控制蛋白的电泳分离率和监测蛋白转膜效率,其他4 种蛋白都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、 兔的IgG 恒定区结合, 因此预染发光Western Blot Marker就能与抗原在同一张胶片上曝出信号,阳性信号可以直接通过Western Blot Marker的位置来判断。另外,预染发光 Western Blot Marker 还可作为Western Blot 试验的阳性对照。
保存条件:-20℃保存,有效期2年。避免反复冻融,建议分装后于-20℃保存。
Western blot预染蛋白Marker(19~110kDa) 使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
CSF3 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
MAPK8IP1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
HMGB4 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
FOXN1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
AES rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
NFATC4 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
IRF4 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
HDAC10 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
FOXJ1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
GCG(GLP2) rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
GDNF rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
HENMT1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
ALK rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
TSPYL2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CXCL14 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
12-Oxograndiflorenic acid腺嘌呤盐酸盐 分子式:C31H52O2 性状:Powder 纯度:%
Yadanzioside K肌苷;次黄嘌呤核苷 分子式:C48H78O19 性状:Powder 纯度:98.0%
Yadanzioside C肌苷(标准品) 分子式:C29H46O2 性状:Powder 纯度:%
Yadanzioside M5‘-腺嘌呤核苷酸二钠盐(AMP2Na) 分子式:C30H46O4 性状:Powder 纯度:%
Yadanzioside P5‘-腺嘌呤核苷酸二钠盐(AMP2Na) 分子式:C30H48O4 性状:Powder 纯度:98.0%
Bruceantinoside A5-溴-2’-脱氧尿苷(BRDU) 分子式:C30H46O4 性状:Powder 纯度:98.5%
Yadanzioside L胞苷;胞嘧啶核苷 分子式:C30H46O3 性状:Powder 纯度:98.0%
Yadanzioside A胞嘧啶核苷,胞苷(标准品) 分子式:C30H48O3 性状:Powder 纯度:98.0%
DehydrobruceantinoldATP,三磷酸脱氧腺苷钠盐 分子式:C30H48O6 性状:Powder 纯度:96.0%
Western blot预染蛋白Marker(19~110kDa) 中文名称 辅肌动蛋白相关LIM蛋白抗体
别 名 Actinin associated LIM protein; Actinin-associated LIM protein; Alpha actinin 2 associated LIM protein; Alpha-actinin-2-associated LIM protein; DKFZp686L0362; Enigma homolog; PDLI3_HUMAN; PDLIM 3; PDLIM-3; PDLIM3; ALP; PDZ and LIM domain 3; PDZ and LIM domain protein 3.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学 信号转导 细胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 39kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PDLIM3
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
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文献和实验后的上清)每个样品做两个复孔。 20 倍稀释法:取 19 μLPBS+1 μL 样品上清,每个样品做两个复孔。 一般细胞蛋白适用于 10 倍稀释法,组织蛋白适用于 20 倍稀释法,总体积为 20 μL。 3) BCA 试剂的配制:BCA A 液:B 液比例为 50:1,此试剂现配现用,注意勿被其他蛋白污染。 4) 待标准曲线和样品复孔加样后,每孔加入 200 μL 的 BCA 混合试剂,置于 37 ℃ 温箱内 15 min。用酶标仪在 568 nm波长下测得 OD 值。测得的标准曲线 OD 值按浓度
除了抗体原因,转膜恐怕是western blot成败的最关键因素。 园子里好多好多人在求助转膜时间,因此我们总结了一系列分子量蛋白转膜的时间,希望对大家有用。 蛋白来源:RAW264.7 总蛋白 蛋白名称(可保密):一些转录因子 蛋白分子量:40~70 KD WB用膜类型、孔径:0.45 NC 转膜方式(恒压、恒流):湿转 恒流400 mA 转膜时间:60~90 min PS.其实
相关专题 Western是利用抗体检测蛋白常用的方法,本手册旨在表明Western-blot的技术原理、操作步骤及常见问题分析,可采用以下步骤进行Western-blot实验: Western-blot技术原理: Western Blot技术是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳后,经PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体
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