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详见说明书
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上海一研
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低温
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1盒
中文名称：ECM Kit(兔IgG)
英文名称：
产品规格：1盒
发货周期：1～3天
用途：适于一抗为兔IgG的Western Blotting 检测。
保存条件：4℃可保存一年 。
Western Blotting 检测试剂盒内容：
1.封闭试剂：10g 蛋白质干粉(脱脂奶粉)。
2.HRP 标记羊抗兔IgG：0.1ml 亲和纯化抗体，经过人血清吸附以去除交叉抗体。
效价 1：2000-10000。
3.ECM 显色剂：总量 10ml。含 A 液 5ml(×20倍)；B 液 5ml(×20倍)。每个试剂盒足够 10 张小膜或800 c ㎡面积的膜显色。
工作原理：
蛋白质的电泳分离是重要的生物化学分离纯化技术之一,电泳是指带电粒子在电场作用下 ,向着与其电荷相反的电极移动的现象。根据所采用的支持物不同,可分为：琼脂糖凝胶电泳、淀粉凝胶电泳、聚丙胺凝胶电泳等。其中以聚胺凝胶电泳(PAGE)最广泛。它的优点为：无电渗作用,样品用量少(1-100μg),分辨率高,可检出 10-9-10-12mol的样品,
凝胶机械强度大,重复性好以及可以通过调节单体浓度或单体与交联剂的比例而得到孔径不同的凝胶。SDS-PAGE 是最常用的定性分析蛋白质的电泳方式,它根据蛋白分子大小不同，迁移速率的不同而达到分离目的，特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量。
免疫印迹是将凝胶电泳的高分辨力和免疫化学检测的特异性融为一体。免疫印迹技术首先借助凝胶电泳将蛋白质抗原分离，然后将凝胶中的蛋白质转印到膜上使之成为被分离的一个拷贝。免疫印迹为检测样品中是否存在目的蛋白提供一种可靠的方法，该法鉴定蛋白质的原理是根据被测蛋白能与特异性抗体结合的特性并通过相对迁移率来体现该蛋白的分子量。
如果想要了解样品中是否存在某一抗原，以及该抗原的含量或该抗原多肽链的相对分子质量以及亚型，是否与其他蛋白结合，蛋白质的酪氨酸残基是否发生磷酸化等有关问题均可采用免疫印迹。
免疫印迹包括多个简单步骤，可在一到两天完成，该方法具有高效，简便，灵敏等特点。
实验操作步骤：
1．蛋白质的样品制备：
1)细胞培养蛋白质样品的制备：
1：胰酶消化后裂解：细胞培养至 80%左右密度时，以含 0.25%胰蛋白酶消化,室温，低速离心，弃上清。细胞经预冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根据细胞数量定)反复吹打。
2：皿上直接裂解：细胞培养至 80%左右密度时，细胞经预冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根据细胞数量定)，用细胞刮刀收集，转移至离心管中，反复吹打。
2)组织样品的制备：新鲜组织块迅速置于预冷的生理盐水中，漂洗数次，按组织净重：裂解液=1：10的比例，加入相应体积的裂解液进行匀浆，离心收集上清(如有粘稠物可超声处理)
3)蛋白变性：处理后的样品加入样品缓冲液(按样品浓度 1：1或1：2的比例)混匀，样品置 1000C的水浴箱加热 3-5分钟，10000g 离心 10分钟，取上清液。(样品可立即使用也可以分装冻存，-20℃可稳定保持数月。)
2．SDS-PAGE 电泳：
1)．制 胶：①按比例配制分离胶(丙胺母液：单体：双体=29：1)，缓缓地摇动溶液，使激活剂混合均匀，将凝胶溶液平缓地注入两层玻璃极中，再在液面上小心注入一层水或正丁醇，以阻止氧气进入凝胶溶液中，37℃恒温箱中静置 60min。
②同前按比例配制浓缩胶，但混匀溶液时不要过于剧烈以免引入过多的氧气。吸去不连续系统中下层分离胶上的水分，以连续平稳的液流注入凝胶溶液，然后小心插入梳子并注意不得在齿尖留有气泡，37℃恒温箱中静置60min 以上以保证完全聚合。
2)加 样：依次加入标准品和待分析样品。(加样时间要尽量短，以免样品扩散，可在未加样的孔中加入等量的样品缓冲液避免边缘效应。样品一般在 1.0mm 厚6、显色(ECM)ECM 显色剂配制:按 1ml 蒸馏水，加显色剂 A、B 各 1 滴混匀。将杂交后印迹膜放入显色盒中,加上混合好的显色液反应约 1-5分钟。吸去印迹膜边缘显色液,将一透明的玻璃纸盖住抚平,以确保×感光胶片的干燥。印迹膜转入暗室中使胶片曝光 30＇-5分钟。
7、显影，定影。 将曝光后的×感光胶片放入显影液中冲洗至胶片上出现条带或者胶片透明为止,再放入定影液中定影，胶片可长期保存。
ECM Kit(兔IgG) 使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
ITK rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CERS5 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CYP17A1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CAT rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
SFRP5 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CASC3 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
KIF22 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
DHDH rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
PTK6 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
EXTL1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
NLRP7 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
SLC4A7 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
ENO1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
CELA1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
UHMK1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
Convallatoxin4,7-二羟基-1,10-菲啰啉(>98.0%(HPLC)) 分子式：C32H46O8 性状：Oil 纯度：95.0%
Cynanoside F5-甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T)) 分子式：C26H30O9 性状：Powder 纯度：97.5%
Periplocoside F1,10-邻二氮杂菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T)) 分子式：C30H48O 性状：Powder 纯度：95.0%
7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-olTPP(=四苯基卟啉) 分子式：C33H52O5 性状：Powder 纯度：96.0%
Minisecolide CTCPP[=四(4-羧苯基)卟吩](>97.0%(HPLC)(T)) 分子式：C30H50O4 性状：Oil 纯度：97.0%
Withaphysalin A偶氮甲碱H(>97.0%(T)) 分子式：C33H50O5 性状：Powder 纯度：97.5%
Aspergillon AN-甲基糠酰羟肟酸(>99.0%(HPLC)) 分子式：C36H58O10 性状：Powder 纯度：98.0%
Convallagenin B2,2'-二辛可宁酸二钾盐水合物(>98.0%(HPLC)) 分子式：C40H64O13 性状：Powder 纯度：97.0%
Glycoursodeoxycholic acid氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T)) 分子式：C30H46O6 性状：Powder 纯度：98.0%
ECM Kit(兔IgG) 中文名称 PDZ结构域PDZK7蛋白抗体
别 名 PDZ domain containing 7; PDZK7; RP11-108L7.9; EG435601; OTTMUSP00000044305; 9130207N01; OTTMUSP00000044304; PDZD7_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 56kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PDZD7
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
（石蜡切片需做抗原修复）
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
英文名称：
产品规格：1盒
发货周期：1～3天
用途：适于一抗为兔IgG的Western Blotting 检测。
保存条件：4℃可保存一年 。
Western Blotting 检测试剂盒内容：
1.封闭试剂：10g 蛋白质干粉(脱脂奶粉)。
2.HRP 标记羊抗兔IgG：0.1ml 亲和纯化抗体，经过人血清吸附以去除交叉抗体。
效价 1：2000-10000。
3.ECM 显色剂：总量 10ml。含 A 液 5ml(×20倍)；B 液 5ml(×20倍)。每个试剂盒足够 10 张小膜或800 c ㎡面积的膜显色。
工作原理：
蛋白质的电泳分离是重要的生物化学分离纯化技术之一,电泳是指带电粒子在电场作用下 ,向着与其电荷相反的电极移动的现象。根据所采用的支持物不同,可分为：琼脂糖凝胶电泳、淀粉凝胶电泳、聚丙胺凝胶电泳等。其中以聚胺凝胶电泳(PAGE)最广泛。它的优点为：无电渗作用,样品用量少(1-100μg),分辨率高,可检出 10-9-10-12mol的样品,
凝胶机械强度大,重复性好以及可以通过调节单体浓度或单体与交联剂的比例而得到孔径不同的凝胶。SDS-PAGE 是最常用的定性分析蛋白质的电泳方式,它根据蛋白分子大小不同，迁移速率的不同而达到分离目的，特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量。
免疫印迹是将凝胶电泳的高分辨力和免疫化学检测的特异性融为一体。免疫印迹技术首先借助凝胶电泳将蛋白质抗原分离，然后将凝胶中的蛋白质转印到膜上使之成为被分离的一个拷贝。免疫印迹为检测样品中是否存在目的蛋白提供一种可靠的方法，该法鉴定蛋白质的原理是根据被测蛋白能与特异性抗体结合的特性并通过相对迁移率来体现该蛋白的分子量。
如果想要了解样品中是否存在某一抗原，以及该抗原的含量或该抗原多肽链的相对分子质量以及亚型，是否与其他蛋白结合，蛋白质的酪氨酸残基是否发生磷酸化等有关问题均可采用免疫印迹。
免疫印迹包括多个简单步骤，可在一到两天完成，该方法具有高效，简便，灵敏等特点。
实验操作步骤：
1．蛋白质的样品制备：
1)细胞培养蛋白质样品的制备：
1：胰酶消化后裂解：细胞培养至 80%左右密度时，以含 0.25%胰蛋白酶消化,室温，低速离心，弃上清。细胞经预冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根据细胞数量定)反复吹打。
2：皿上直接裂解：细胞培养至 80%左右密度时，细胞经预冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根据细胞数量定)，用细胞刮刀收集，转移至离心管中，反复吹打。
2)组织样品的制备：新鲜组织块迅速置于预冷的生理盐水中，漂洗数次，按组织净重：裂解液=1：10的比例，加入相应体积的裂解液进行匀浆，离心收集上清(如有粘稠物可超声处理)
3)蛋白变性：处理后的样品加入样品缓冲液(按样品浓度 1：1或1：2的比例)混匀，样品置 1000C的水浴箱加热 3-5分钟，10000g 离心 10分钟，取上清液。(样品可立即使用也可以分装冻存，-20℃可稳定保持数月。)
2．SDS-PAGE 电泳：
1)．制 胶：①按比例配制分离胶(丙胺母液：单体：双体=29：1)，缓缓地摇动溶液，使激活剂混合均匀，将凝胶溶液平缓地注入两层玻璃极中，再在液面上小心注入一层水或正丁醇，以阻止氧气进入凝胶溶液中，37℃恒温箱中静置 60min。
②同前按比例配制浓缩胶，但混匀溶液时不要过于剧烈以免引入过多的氧气。吸去不连续系统中下层分离胶上的水分，以连续平稳的液流注入凝胶溶液，然后小心插入梳子并注意不得在齿尖留有气泡，37℃恒温箱中静置60min 以上以保证完全聚合。
2)加 样：依次加入标准品和待分析样品。(加样时间要尽量短，以免样品扩散，可在未加样的孔中加入等量的样品缓冲液避免边缘效应。样品一般在 1.0mm 厚6、显色(ECM)ECM 显色剂配制:按 1ml 蒸馏水，加显色剂 A、B 各 1 滴混匀。将杂交后印迹膜放入显色盒中,加上混合好的显色液反应约 1-5分钟。吸去印迹膜边缘显色液,将一透明的玻璃纸盖住抚平,以确保×感光胶片的干燥。印迹膜转入暗室中使胶片曝光 30＇-5分钟。
7、显影，定影。 将曝光后的×感光胶片放入显影液中冲洗至胶片上出现条带或者胶片透明为止,再放入定影液中定影，胶片可长期保存。
ECM Kit(兔IgG) 使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
ITK rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CERS5 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CYP17A1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CAT rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
SFRP5 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CASC3 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
KIF22 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
DHDH rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
PTK6 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
EXTL1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
NLRP7 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
SLC4A7 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
ENO1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
CELA1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
UHMK1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
Convallatoxin4,7-二羟基-1,10-菲啰啉(>98.0%(HPLC)) 分子式：C32H46O8 性状：Oil 纯度：95.0%
Cynanoside F5-甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T)) 分子式：C26H30O9 性状：Powder 纯度：97.5%
Periplocoside F1,10-邻二氮杂菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T)) 分子式：C30H48O 性状：Powder 纯度：95.0%
7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-olTPP(=四苯基卟啉) 分子式：C33H52O5 性状：Powder 纯度：96.0%
Minisecolide CTCPP[=四(4-羧苯基)卟吩](>97.0%(HPLC)(T)) 分子式：C30H50O4 性状：Oil 纯度：97.0%
Withaphysalin A偶氮甲碱H(>97.0%(T)) 分子式：C33H50O5 性状：Powder 纯度：97.5%
Aspergillon AN-甲基糠酰羟肟酸(>99.0%(HPLC)) 分子式：C36H58O10 性状：Powder 纯度：98.0%
Convallagenin B2,2'-二辛可宁酸二钾盐水合物(>98.0%(HPLC)) 分子式：C40H64O13 性状：Powder 纯度：97.0%
Glycoursodeoxycholic acid氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T)) 分子式：C30H46O6 性状：Powder 纯度：98.0%
ECM Kit(兔IgG) 中文名称 PDZ结构域PDZK7蛋白抗体
别 名 PDZ domain containing 7; PDZK7; RP11-108L7.9; EG435601; OTTMUSP00000044305; 9130207N01; OTTMUSP00000044304; PDZD7_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 56kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PDZD7
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
（石蜡切片需做抗原修复）
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
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