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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
31
- 英文名:
Chromatin Immunoprecipitation(ChIP)Assay Kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
22次
英文名称:Chromatin Immunoprecipitation(ChIP)Assay Kit
产品规格:22次
发货周期:1~3天
本试剂盒用于通过免疫沉淀来沉淀和目标蛋白结合的染色质片段,最后通过PCR或Southern等方法来检测沉淀的染色质片段的试剂盒。通常用于检测特定的转录因子或组蛋白等基因组DNA结合蛋白是否和预期的特定基因组DNA序列在同一复合物中。
通过ChIP检测可以获得在体的(In Vivo)目标蛋白和预期基因组DNA片段是否在同一复合物中的结论。EMSA,也称gel shift获得的结果是体外的(In Vitro)目标蛋白和预期基因组DNA片段的结合结果,可以推断细胞内也发生类似的结合,但并不代表该情况在细胞内也真实发生。而ChIP的检测结果则可明确说明这种结合在细胞内是真实发生的。
本ChIP Assay Kit采用了Protein A+G Agarose,比Protein A Agarose或Protein G Agarose适合于免疫沉淀更多种类的抗体,包括mouse IgG1,IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, rabbit IgG, rabbit and goat polyclonal Abs,以及human IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。
本试剂盒中经过Salmon Sperm DNA预饱和的Protein A+G Agarose和目的基因组DNA的非特异性结合大大下降。
提供了预混合的对照引物(Control Primers)。可用于扩增human GAPDH的部分相应序列,引物序列为:
5'-TACTAGCGGTTTTACGGGCG-3';
5'-TCGAACAGGAGGAGCAGAGAGCGA-3'
本ChIP Assay Kit如果用于常规的染色质免疫沉淀,共可以免疫沉淀22个样品。
产品组份:
Protein A+G Agarose/Salmon Sperm DNA————3ml
Glycine Solution(10X)————————————30ml
ChIP Dilution Buffer————————————48ml
Low Salt Immune Complex Wash Buffer————24ml
High Salt Immune Complex Wash Buffer————24ml
LiCl Immune Complex Wash Buffer——————24ml
TE Buffer—————————————————48ml
0.5M EDTA—————————————————250μl
5M NaCl——————————————————500μl
1M Tris, pH 6.5——————————————500μl
SDS Lysis Buffer—————————————10ml
Control Primers(5μM each)————————0.1ml
储存条件:4℃避光,有效期一年。使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒) 使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
SIRT4 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
ZNF281 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
TPD52L2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
APOBEC1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
SERPING1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
EVA1A rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
ESPN rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
PRSS8 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
TRIM27 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
ADCY5 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
ASB9 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
DSCC1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
UCK2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
CCR6 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
VAX1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
1,2-Cyclohexanedicarboximide2-NP-AOZ(标准品) 分子式:C19H18O3 性状:Yellow powder 纯度:%
Perospirone hydrochloride磺胺醋酰(标准品) 分子式:C19H22O4 性状:Powder 纯度:98.0%
Sildenafil citrate磺胺喹噁啉(标准品) 分子式:C19H24O4 性状:Powder 纯度:98.5%
Amlexanox磺胺氯吡嗪(标准品) 分子式:C17H18O6 性状:Powder 纯度:%
Losartan泰妙菌素(标准品) 分子式:C44H36O13 性状:Powder 纯度:%
Glyburide碘化铯(用于高通量质谱,99.9995%) 分子式:C15H14O4 性状:Yellow powder 纯度:98.5%
Rosiglitazone1,3-二甲基-2-咪唑啉酮(用于GC-HS,≥99.8%(GC)) 分子式:C8H8O5 性状:Powder 纯度:98.0%
Cialis二甲基亚砜(农残级) 分子式:C17H14O5 性状:Powder 纯度:%
Varenicline tartrate十二烷基三甲基氯化铵(DTAC)(99%,离子对色谱级) 分子式:C23H28O7 性状:Oil 纯度:95.0%
染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒) 中文名称 原钙粘蛋白γC5抗体
别 名 PCDH-gamma-C5; Protocadherin gamma C5; protocadherin gamma subfamily C, 5; MGC138286; MGC138288; PCDGM_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 神经生物学 信号转导 细胞粘附分子 细胞骨架 细胞膜蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 99kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PCDHGC5
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
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文献和实验抗体基础实验学习视频系列之三染色质免疫共沉淀实验(CHIP)视频教程,详细演示从裂解液制备到 DNA 定量的全过程。
单杂交系统等。但这些方法都有一定的局限性,不能充分反映生理情况下DNA与蛋白相互作用的真实情况,而且很难捕捉到在染色质水平上基因表达调控的动态瞬时事件。染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,简称ChIP)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性,可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。特别是近年来由于该技术不断的发展和完善,其应用范围已经从研究目的蛋白与已知靶序列间的相互作用,发展到研究目的蛋白与整个基因组的未知
染色质免疫沉淀芯片 (Chip-Chip) NimbleGen是目前能提供定制ChIP―Chip服务的第一家公司。该技术能够快速在目标基因组的染色体中确定特异DNA结合蛋白的准确结合位点,ChIP芯片也可以在一个基因组的任何感兴趣的区域内寻找染色体的结构改变。 1.ChIP―Chip的用途 (1)在基因 组范围内确定基因转录因子的DNA结合位点和其他DNA结合蛋白或蛋白复合体的DNA结合位点。 (2)染色体活性
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