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文献和实验江janice 求助:用的是天根 的胶回收试剂盒,11管PCR产物,差不多500微升的总体积,上四个孔电泳,电泳后用天根的盒子回收到四个EP管,每管40微升,取5微升电泳,居然没有成功,又取10微升电泳还是没有任何条带,不知道可否有人用天根的盒子,是否遇到这方面的问题,一般100微升的PCR产物,回收到多少体积比较恰当,纠结啊,回收了好几次电泳都没有目的条带,盒子是刚买的新盒子,谢谢好心人帮助 大鹏鸟 天根的盒子还是很好
等。 1)尽量选择新鲜花/叶; 2)出汁率:200~300 mL/kg; 3)推荐榨汁机:电动碾磨榨汁机; 4)花/叶质量参考: 100 g 左右花叶(只包含待提取部位质量,如花瓣、植物叶等),榨汁处理后得到 20~30 mL 汁液,按推荐试剂盒进行前处理后,浓缩 50 倍,得到 400 μL 左右植物囊泡。 5)处理: ① 花需要去除花托、花萼和花蕊,只保留待提取部位的花瓣; ② 植物叶需要去除蔫掉的叶片和植物的茎,只保留待提取部位的植物叶。 6)提取试剂盒推荐:宇玫博 UR5220 植物囊泡提取纯化试剂盒
改善EMSA的电泳结果。如需纯化,可以按照如 下步骤操作:(1) 对于100微升标记好的探针,加入1/4体积即25微升的5M醋酸铵,再加入2体积即200微升的无水乙醇,混匀。(2) 在-70℃至-80℃沉淀1小时,或在-20℃沉淀过夜。(3) 在4℃,12, 000g-16, 000g离心30分钟。小心去除上清,切不可触及沉。(4) 在4℃,12, 000g-16, 000g离心1分钟。小心吸去残余液体。微晾干沉淀,但不宜过分干燥。(5) 加入100微升TE,完全溶解沉淀。标记好的探针最好立即使用
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