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- 2025年07月16日
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大量
- 英文名：
DNA-Grade HEPES Solution（DNA级HEPES溶液），1M，pH7.3
- 保质期：
2年
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
常温
| 名称 | 规格 | 价格 |
| DNA-Grade HEPES Solution（DNA级HEPES溶液），1M，pH7.3 | 250 mL | 480 |
| 运输：常温 保存：4-25℃ 有效期：2年 货期：1-3天 |
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只要知道缓冲对的PH值，和要配制的缓冲液的pH值（及要求的缓冲液总浓度），就能按公式计算[盐]和[酸]的量。这个算法涉及对数换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，为为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系并列出了表格。只要我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可计算出所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。
经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。
计算好后，按计算结果准确称好固态化学成分，放于烧杯中，加少量蒸馏水溶解，转移入50ml容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，就能得到所需的缓冲液。
各种缓冲溶液的配制，均按表格按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确浓度才能进行，如醋酸等。另外，所有缓冲溶剂的配制计量都能从以上的算式准确获得。
实验方法原理
溶液pH值的测定，在自然科学各个领域中都有广泛的应用，在医药领域中有着非常重要的意义。例如合成或分析反应条件的控制，注射液或其他药剂的配制等，经常需要准确测定pH值。所以溶液pH值的测定是仪器分析中普及程度非常高的一种方法。
1. 基本概念
在一定程度上能抵抗外加少量酸、碱或稀释，而保持溶液pH值基本不变的作用称为缓冲作用。具有缓冲作用的溶液称为缓冲溶液。
2. 缓冲溶液组成及计算公式 缓冲溶液一般是由共轭酸碱对组成的，例如弱酸和弱酸盐，或弱碱和弱碱盐。如果缓冲溶液由弱酸和弱酸盐 (例如HAc-NaAc)组成
3. 缓冲溶液性质
a.抗酸/碱,抗稀释作用 因为缓冲溶液中具有抗酸成分和抗碱成分，所以加入少量强酸或强碱，其pH值基本上是不变的。稀释缓冲溶液时，酸和碱的浓度比值不改变，适当稀释不影响其pH值。
b.缓冲容量缓冲容量是衡量缓冲溶液缓冲能力大小的尺度。缓冲容量的大小与缓冲组分浓度和缓冲组分的比值有关。缓冲组分浓度越大，缓冲容量越大；缓冲组分比值为1时，缓冲容量最大。
实验步骤：
1. 缓冲溶液的配制与pH值的测定
通过计算配制三种不同pH值的缓冲溶液，然后用精密pH试纸和pH计分别测定它们的pH值, pH计的使用要严格按照仪器说明书操作,事先要用适当的pH标准物质校准。测量完毕后，将测定结果进行比较，看理论计算值与两种测定方法实验值是否相符(溶液留作后面实验用)。
2. 缓冲溶液的性质
（1） 取3支试管，依次加入蒸馏水，pH=4的HCl溶液，pH =10的NaOH溶液各3mL，用pH试纸测其pH值，然后向各管加入5滴0.1 mol／L HCl，再测其pH值。用相同的方法，试验5滴0.1 mol／L NaOH对上述三种溶液pH值的影响。将结果记录在表2中。
（2） 取3支试管，依次加入自己配制的pH=4.0、pH=7.0、pH=10.0的缓冲溶液各3mL。然后向各管加入5滴0.1 mol／L HCl，用精密pH试纸测其pH值。用相同的方法，试验5滴0.1 mol/L NaOH对上述三种缓冲溶液pH值的影响。将结果记录在表2中。
（3） 取5支试管，依次分别加入pH=4的HCl溶液，pH=10的NaOH溶液及pH=4.0缓冲溶液、pH=7.0缓冲溶液、pH=10.0的缓冲溶液各1 ml，用精密pH试纸测定各管中溶液的pH值。然后向各管中加入10 ml水，混匀后再用精密pH试纸测其pH值，考查稀释上述五种溶液pH值的影响。将实验结果记录于表2,通过以上实验结果，说明缓冲溶液的什么性质。
3. 缓冲溶液的缓冲容量
（1） 缓冲容量与缓冲组分浓度的关系 : 取两支大试管，在一试管中加入0.1 mol／L HAc和0.1 mol／L NaAc各3ml，另一试管中加入1 mol／L HAc和1 mol／L NaAc各3ml，混匀后用精密pH试纸测定两试管内溶液的pH值(是否相同)？在两试管中分别滴入2滴甲基红指示剂，溶液呈何色？(甲基红在pH<4.2时呈红色，pH>6.3时呈黄色)。然后在两试管中分别逐滴加入1 mol／L NaOH溶液(每加入1滴NaOH均需摇匀)，直至溶液的颜色变成黄色。记录各试管所滴入NaOH的滴数，说明哪一试管中缓冲溶液的缓冲容量大。
（2） 缓冲容量与缓冲组分比值的关系: 取两支大试管，用吸量管在一试管中加入NaH2PO4和Na2HPO4各10 ml，另一试管中加入2ml 0.1 mol／L NaH2PO4和18ml 0.1 mol／L Na2HPO4，混匀后用精密pH试纸分别测量两试管中溶液的pH值。然后在每试管中各加入1.8mlmol／L NaOH，混匀后再用精密pH试纸分别测量两试管中溶液的pH值。
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文献和实验试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。 关于HEPES 缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES+NaOH，另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下： 一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制 119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES
试剂盒（玻璃乳法）:（1）在 UV 灯下，从琼脂糖凝胶上切下含 DNA 片段的凝胶，放入一离心管中；（2）加入 3 倍体积的 6 mol/L NaI 溶液，45～55 ℃ 水浴 5～10 min 使胶完全融化；（3）加入 10? 滋 l 玻璃乳悬液，轻弹管底混匀，然后 45～55 ℃ 水浴 5～10 min，期间每 2～3 min 混匀一次；（4）5000 rpm 离心 30~60 秒，弃上清；（5) 加 400? 滋 l 漂洗液（20 mM Tris.Cl，pH7.4/1 mM EDTA/100 mM
DNA—— -20℃—— -70℃低温保存。 B 直接加入10µ RNase-A（10mg/ml）后冷冻保存。 试剂 配方 1M Tris-HCl ( pH7.4, 7.6, 8.0 ) pH 浓HCl Tris 去离子水 7.4 约70ml 121.1g
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