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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
NAD kinase (NADK) detection kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
50管/48样
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中文名称:NAD激酶(NADK)测试盒(可见分光光度法)
英文名称:NAD kinase (NADK) detection kit
产品规格:50管/48样
发货周期:1~3天
测定意义:
NADK(EC 2.7.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是目前所发现的生物体内惟一能够催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或无机多酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及调节NAD(H)与NADP(H)的平衡上具有重要作用。
测定原理:
NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPH;NADPH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT),通过在600 nm下测定MTT的还原速度(吸光值的变化)可反映出NADK活性的大小。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
NAD激酶(NADK)测试盒(可见分光光度法) 使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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文献和实验肌酸激酶(CK)是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体,正常人体中有三种同工酶: CK~BB(CK1):主要存于脑组织、前列腺、肠、肺、膀胱、子宫、胎盘及甲状腺中; CK~MB(CK2):主要存于心肌; CK~MM(CK3):主要存于肌肉组织。 CK作用后生成的磷酸肌酸含高能医学教育网整理磷酸键,是肌肉收缩时能量的直接来源。 1.原理 本法采用酶偶联反应测定CK活性浓度。 在340nm监测NAD(P)H的生成量,可计算出CK的活性浓度
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CK是由M和B亚单位组成的二聚体,两种不同的亚基组成三种同工酶。 CK-BB(CK1)主要存于脑组织。 CK-MB(CK2)主要存于心肌。 CK-MM(CK3)主要存于骨骼肌组织。 此外在线粒体中还存在一种同工酶(CK-MiMi)。 心肌不同部位CK-MB含量也不尽相同,前壁>后壁,右心室>左心室,所以不同部位AMI时MB的释放量不仅与梗塞面积、程度有关,也和梗塞部位有关。 CK-MB测定方法:两种。 测活性:免疫抑制一酶动力学法
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