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- 2025年07月15日
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Cas9X | 海星生物
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干细胞 | 细胞系流式检测
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检测报告
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服务周期：1个月
服务价格：800-5600元（交付报告）
细胞流式检测服务
1. 细胞表面标记检测服务
流式细胞术（FCM）已广泛地应用于基础研究，并逐步进入临床检测，用流式细胞仪对细胞表面的抗原成分进行标记分析，可区别多种细胞。细胞表面标记主要包括表面受体和表面抗原，对细胞表面标记的检测已广泛用于基础、临床免疫学研究和患者免疫功能的测定，如对间充质干细胞表面标记检测。
2006年国际细胞治疗协会（ISCT）规定了间充质干细胞的最低鉴定标准：
- 基本条件下贴壁生长
- 表达CD105、CD73、CD90，不表达CD45、CD34、CD14/CD11b、CD79a/ CD19、HLA-DR；
- 体外可以诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞、成软骨细胞。
图1 Human MSC检测指标分别有CD105（+）、CD29（+）、CD73（+）
CD34（-）、CD45（-）、CD11b（-）、CD44（+）
2. 细胞凋亡检测服务：
细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。通常使用细胞凋亡检测试剂盒，如常见的Annexin V荧光双染法，其检测原理为：
Annexin V/ Annexin A5为胞内蛋白膜联蛋白家族成员，以钙依赖的方式与磷脂酰丝氨酸(PS)结合。PS存在于正常细胞浆膜的内层，但在凋亡早期，膜不对称性丧失，PS易位至细胞表面。荧光标记的 Annexin V可与之特异性结合，表明该细胞为早期凋亡细胞。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞，呈现红色荧光。
图2 活细胞比例约88.14%，凋亡早期细胞约1.68%，
凋亡晚期或坏死细胞约2.66%，裸核细胞约7.53%
3. 细胞周期检测服务：
碘化丙啶(Propidium，简称PI)是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。
碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。
图3 细胞周期拟合图
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