- ¥2686
- KALANG/康朗生物
- KL-32201
- 中国/上海
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
草鱼出血病II型病毒（GCRV II）RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法）
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
请于-20℃条件下保存
草鱼出血病 II 型病毒（GCRV II） 核酸检测试剂盒（一管式恒温荧光法）
◆ 产品说明
动物疫病检测系列基于独特的恒温荧光检测技术，可针对食品、动物组织等样品中病毒的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于对草鱼出血病 II 型病毒（GCRV II）的检测，检出限为103copies/μl 基因组 RNA。
◆ 产品组成（48 测试）
试剂 含量
A-GCRV II-I 22μL× 48 管
B-I 90 μL × 1 支
R-I 20 μL × 1 支
PG-GCRV II-I 50 μL × 1 支
◆ 适用仪器
Dhelix-C、ESE Tube Scanner、Genie II、Deaou-308C 等恒温荧光检测仪，ABI 7500，LightCycler480，CFX 96 等荧光 PCR 仪。
◆ 自备耗材和仪器
①灭菌 1.5mL 或 2.0mL 离心管；②冰盒；③移液器（0.1-2.5μL，0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；④离心机；⑤涡旋混匀器；⑥金属浴
◆注意事项
1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
1）第一区：样本制备区。
2）第二区：模板添加区。
3）第三区：扩增及产物分析区。
★分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。
2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒。
5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。
◆ 样品处理
参照《SN/T 3584-2013 草鱼出血病检疫技术规范》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。
详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。
◆ 实验操作
1. 模板制备（样本制备区）
建议使用配套水生动物病害基因组 DNA/RNA 提取试剂盒系列产品，具体过程详见产品说明书。
请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月
2．添加模板（模板添加区，放置于冰盒中进行）
取出所需测试数的已含有反应液 A-GCRV II-I 的 PCR 管，将试剂完全解冻，离心 30 秒，在管盖上标记管名（阴性对照管 NG、样品 XX、阳性对照管 PG）。打开管盖向各管管底分别加入 0.8μL B-I 及 0.2μL R-I，盖上阴性对照管管盖，其他各管分别沿管壁加入 2μL 模板，顺序为待测样品模板、PG-GCRV II-I，依次盖好各管管盖，离心 30 秒，立即进行扩增反应。
3. 扩增反应（扩增及产物分析区）
①恒温仪器 63℃条件下反应 60 min。待仪器升温至 63℃后，新建程序，设置实验名称及反应时间，将步骤 2 中离心后的 PCR 反应管放入恒温荧光分子检测仪，点击开始检测。
②若使用荧光定量 PCR 仪，则荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 None，将 63℃ 15 s，63℃ 45 s 作为一个循环，于 63℃ 45 s 处收集荧光信号，60 个循环。
其他仪器请参照仪器说明书进行设置。
◆ 结果判定
①仪器自动判定结果，若显示“阳性”，则样品中含有草鱼出血病 II 型病毒（GCRV II）；若显示“阴性”，且没有出现 S 型扩增曲线，则样品中不含有对草鱼出血病 II 型病毒（GCRV II）或含量低于检出限。
②在荧光定量 PCR 仪上，根据有无“S”型扩增曲线判定结果。若有“S”型扩增曲线，则样品中含有草鱼出血病 II 型病毒（GCRV II）；若无“S”型扩增曲线，则样品中不含有草鱼出血病 II 型病毒（GCRV II）或含量低于检测限。
★ NG 反应管结果显示“阴性”，PG 反应管结果显示“阳性”，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。
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文献和实验成熟的 crRNA。在 II 型系统中，Pre-crRNA 可通过重复序列与其互补序列 transacting RNA（trancrRNA）反式结合，然后在 Cas9 存在的情况下被 RNaseIII 加工融合成一个 sgRNA。目前，II 型系统是最成熟也是应用最广的类型，而 Cas9 已经变成了在多种细胞类型和组织中靶向基因编辑的强大工具。第三阶段：靶向干扰（Target interference）I 型和 II 型系统均可靶向含有与 PAM 和 protospacer 互补序列的 dsDNA
Cell：诺奖得主新作！在大量病毒中发现微型 CRISPR 系统，可高效编辑人类和植物基因组
和 VI 型系统（识别竞争噬菌体的转录物），III 型系统保留切割 ssDNA 并能够切割靶 DNA 所需的催化残基。 （2）在一些噬菌体 I 型系统中不存在 Cas3 核酸酶，但可能招募 IV 型系统中的效应子。 噬菌体基因组是一个微型 CRISPR-Cas 系统的天然储库，包括属于 Cas9 和 Cas12 超家族的 DNA 靶向 II 型和 V 型酶。与原核基因组中占主导的多亚基 I 型和 III 型 CRISPR 系统不同，噬菌体中显著富集微型 Cas12 家族酶。由于噬菌体进化迅速
的快速灵敏的方法。由于cDNA包括了编码蛋白的完整序列而且不含内含子，只要略经改造便可直接用于基因工程表达和功能研究，因此RT-PCR成为目前获得目的基因的一种重要手段。 RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平、表达差异，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。RT-PCR比其他包括Northern印迹、RNase保护分析、原位杂交及S1核酸酶分析在内的RNA分析技术，更灵敏，更易于操作。 RT-PCR的基本原理（图4.1）。首先是在逆转
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