- ¥2686
- KALANG/康朗生物
- KL-32071
- 中国/上海
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
鲤春病毒血症病毒（SVCV）RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法）
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
请于-20℃条件下保存
鲤春病毒血症病毒（SVCV） 核酸检测试剂盒（一管式恒温荧光法）
◆ 产品说明
动物疫病检测系列基于独特的恒温荧光检测技术，可针对食品、动物组织等样品中病毒的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于对鲤春病毒血症病毒（SVCV）的检测，检出限为 103copies/μl基因组 RNA。
◆ 产品组成（48 测试）
试剂 含量
A-SVCV-I 22μL× 48 管
B-I 90 μL × 1 支
R-I 20 μL × 1 支
PG-SVCV-I 50 μL × 1 支
◆ 适用仪器
Dhelix-C、ESE Tube Scanner、Genie II、Deaou-308C 等恒温荧光检测仪，ABI 7500，LightCycler480，CFX 96 等荧光 PCR 仪。
◆ 自备耗材和仪器
①灭菌 1.5mL 或 2.0mL 离心管；②冰盒；③移液器（0.1-2.5μL，0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；④离心机；⑤涡旋混匀器；⑥金属浴
◆ 注意事项
1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
1）第一区：样本制备区。
2）第二区：模板添加区。
3）第三区：扩增及产物分析区。
★分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。
2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒。
5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。
◆ 样品处理
参照《GB/T 15805 鱼类检疫方法 第 5 部分：鲤春病毒血症病毒（SVCV）》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。
详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。
◆ 实验操作
1. 模板制备（样本制备区）
请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月
建议使用配套水生动物病害基因组 DNA/RNA 提取试剂盒系列产品，具体过程详见产品说明书。
2．添加模板（模板添加区，放置于冰盒中进行）
取出所需测试数的已含有反应液 A-SVCV-I 的 PCR 管，将试剂完全解冻，离心 30 秒，在管盖上标记管名（阴性对照管 NG、样品 XX、阳性对照管 PG）。打开管盖向各管管底分别加入 0.8μL B-I 及 0.2μL R-I，盖上阴性对照管管盖，其他各管分别沿管壁加入 2μL 模板，顺序为待测样品模板、PG-SVCV-I，依次盖好各管管盖，离心 30 秒，立即进行扩增反应。
3. 扩增反应（扩增及产物分析区）
①恒温仪器 63℃条件下反应 60 min。待仪器升温至 63℃后，新建程序，设置实验名称及反应时间，将步骤 2 中离心后的 PCR 反应管放入恒温荧光分子检测仪，点击开始检测。
②若使用荧光定量 PCR 仪，则荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 None，将 63℃ 15 s，63℃ 45 s 作为一个循环，于 63℃ 45 s 处收集荧光信号，60 个循环。
其他仪器请参照仪器说明书进行设置。
◆ 结果判定
①仪器自动判定结果，若显示“阳性”，则样品中含有鲤春病毒血症病毒（SVCV）；若显示“阴性”，且没有出现S 型扩增曲线，则样品中不含有对鲤春病毒血症病毒（SVCV）或含量低于检出限。
②在荧光定量 PCR 仪上，根据有无“S”型扩增曲线判定结果。若有“S”型扩增曲线，则样品中含有鲤春病毒血症病毒（SVCV）；若无“S”型扩增曲线，则样品中不含有鲤春病毒血症病毒（SVCV）或含量低于检测限。
★ NG 反应管结果显示“阴性”，PG 反应管结果显示“阳性”，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。
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文献和实验法是一项新型的核酸扩增技术，一小时内可以检测出IHHNV结果。广州双螺旋基因技术有限公司根据恒温PCR原理，研发出Dhelix-C水产病害检测仪，配合使用恒温荧光法IHHNV核酸检测试剂盒，在65°C的恒温条件下反应，利用Bst DNA聚合酶完成置换扩增。反应体系中含有荧光染料，Dhelix-C水产病害检测仪能通过光学软件检测扩增后荧光信号的变化，将荧光信号表达为扩增曲线，同时仪器自动判读检测结果，从取样到结果显示仅需1~2个小时，仪器操作简单，非专业背景人员也可以轻松掌握，更适用于对虾IHHNV现场
状态，病毒颗粒直径为150nm ，核酸为单股负链RNA，不分节段，有囊膜，囊膜表面有两种糖蛋白刺突：一种为G蛋白（90K），它能使RSV吸附于宿主细胞上导致感染开始；另一种为F蛋白，该蛋白被宿主蛋白酶切割成F1（48K）和F2（26K）两个片段后才具有活性，能引起病毒囊膜与宿主细胞膜融合，有利于病毒穿入细胞，它可能在RSV感染的免疫病理中起主要作用。在囊膜的内面是内膜蛋白，它非糖基化，称为M蛋白，具有维持病毒体的结构和完整性的作用。该病毒无血凝素和神经氨酸酶，也不具溶血特性，其刺突糖蛋白F（F1
副粘病毒 形态和大小(nm) 核酸类型 核衣壳形成部位 血凝素 神经氨酸酶 溶血作用 融细胞作用 包涵体形成 鸡胚中生成 多形性80～120 单股负链RNA，分节段 细胞核内
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