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26
- 英文名:
20S proteasome Inhibitor
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
10mM×0.2ml|5mg|25mg
英文名称:20S proteasome Inhibitor
产品规格:10mM×0.2ml|5mg|25mg
本品在水溶液或血浆中立即水解为具有具有生物活性的MLN2238。MLN2238抑制20S proteasome的胰凝乳蛋白酶等蛋白水解位点(β5),无细胞试验中IC50/Ki为3.4nM/0.93nM,对β1作用效果稍弱,对β2几乎没有抑制活性。
CAS:1201902-80-8
分子式:C20H23BCl2N2O9
分子量:517.12
纯度:99.2%
与bortezomib相比,MLN9708分离半衰期更短,药物动力学、药效及抗癌活性更高。MLN9708是二代小分子蛋白酶体抑制剂,用于治疗多种人类恶性胶质瘤。和水溶液和血浆接触后,MLN9708快速水解为MLN2238。MLN2238是MLN9708的生物活性形式。MLN2238是氮端加帽的二肽亮氨酸硼酸,抑制20S蛋白酶体的糜蛋白酶类(β5)水解位点,IC50为3.4nM,Ki值为0.93nM。更高浓度时,MLN2238也抑制20S蛋白酶体的caspase类水解(β1)位点和胰蛋白酶类水解(β2)位点,IC50分别为31nM和3.5μM。MLN2238是蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂,这种可逆性存在时间依赖性。
储存条件:-20℃,有效期12个月。使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
20S蛋白酶体抑制剂(MLN9708)使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
可溶性CD105Elisa检测试剂盒 Nateglinide 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养
可溶性CD146分子Elisa检测试剂盒 Astragaloside IV 质量规格:>98%,BR
可溶性CD14Elisa检测试剂盒 Nateglinide 质量规格:HPLC>99%,标准品
可溶性CD163分子Elisa检测试剂盒 Astragaloside IV 质量规格:>98%,分析标准品
可溶性CD21Elisa检测试剂盒 Moclobemide 质量规格:>98%,标准品
可溶性CD276分子Elisa检测试剂盒 Moclobemide 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养
可溶性CD28Elisa检测试剂盒 Stavudine 质量规格:>98,标准品
可溶性CD30配体Elisa检测试剂盒 Stavudine 质量规格:>98,BR,可用于细胞培养
可溶性CD38Elisa检测试剂盒 Vitamin E,dl-α-tocopherol 质量规格:>98%,油状
可溶性CD40配体Elisa检测试剂盒 Pullulan 质量规格:Viscosity100-180 mPa-s;BR
可溶性CD44变体9Elisa检测试剂盒 Tirofiban HCl 质量规格:HPLC>99,标准品
可溶性CD80Elisa检测试剂盒 Bentonite 质量规格:Bentone SD-2,适于中高极性溶剂
可溶性CD80Elisa检测试剂盒 Activated charcoal 质量规格:AR,200目,粉末状,褐色
可溶性CD86Elisa检测试剂盒 Tirofiban HCl 质量规格:>99%,一水物,BR
可溶性EndoglinElisa检测试剂盒 Tetrahydro-L-Biopterin free base 质量规格:>99%
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pEF4/V5-His ADSCC1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB包装:100 ul
pEF6/myc-His CUCK2 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
pEFFP-C2CCR6 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
pEGFP-1VAX1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
20S蛋白酶体抑制剂(MLN9708)Natrexone 抗纳曲酮抗体IgG规格: 0.2ml请询价5 x 10^5 cells/T25培养瓶原代细胞
NAP1/NAP1L1 核小体组装蛋白1抗体规格: 0.2ml请询价5 x 10^5 cells/T25培养瓶原代细胞
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Phospho-p95/NBS1 (Ser343) 磷酸化DNA修复蛋白NBS1抗体规格: 0.1ml请询价5 x 10^5 cells/T25培养瓶原代细胞
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文献和实验的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。 常用抑制剂 PMSF 1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 2)10mg/ml溶于异丙醇中; 3)在室温下可保存一年; 4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L); 5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。 EDTA 1)抑制金属
泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system, UPS)是细胞内蛋白质降解的主要途径,参与细胞内80%以上蛋白质的降解。本视频清楚地解析了泛素-蛋白酶体系统的作用及工作流程。 泛素-蛋白酶体系统作用及工作流程
问:请教一个实验问题,PMSF,胃酶抑制剂以及DTT会不会影响HRP活性?要做ELISA,样品中不知道可不可以加复合蛋白酶抑制剂?请大牛指教!答:不会影响酶活性,因为蛋白酶抑制剂,抑制的是蛋白水解酶活性。而HRP不是蛋白酶类,而是过氧化酶。(不过dtt肯定会破坏HRP)。即使会影响酶活性,实际上做elisa也不影响,因为加样品和加hrp是分开的,不存在。 答:我在研究各种抑制剂对L-氨基酸氧化酶酶活性的抑制作用的时候,测定L-氨基酸氧化酶活性的体系含有HRP。我们首先用各种抑制剂对HRP水解
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