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- 百奥莱博
- JN0065-GDQ
- 北京
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
59
- 英文名：
Cas9 Protein
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50μg
特别提示：包括Cas9蛋白(Cas9核酸酶)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Cas9蛋白(Cas9核酸酶)
英文名称：Cas9 Protein
产品货号：JN0065
产品规格：50μg
CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR/Cas9系统通过将入侵噬菌体和质粒DNA的片段整合到CRISPR序列中，并利用相应的CRISPR RNAs（crRNAs）来指导Cas9蛋白对同源序列的降解，从而提供免疫性。人工改造过的Cas9/sgRNA系统通过sgRNA（short guide RNA）引导Cas9蛋白识别并剪切带有sgRNA靶点的双链DNA，可用于基因敲除和精确编辑DNA等操作。
产品特点：纯蛋白体系，避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰。
产品用途：
1、基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除；
2、基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入；
3、sgRNA剪切靶点DNA的效率检测，降低体内筛选成本；
4、体外剪切靶DNA的特异位点。
应用实例：
图例一）Cas9核酸内切酶DNA片段切割活性检测。
带有靶位点的DNA片段：6100bp；酶切后的片段：3900bp和2200bp。
活性定义：37℃，在sgRNA足量的20μL反应体系中，1h完全切割1μg质粒或线性化DNA所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留；无核酸内、外切酶污染；无RNase污染。
体外切割体系（20μl）：
| 组分 | 体积 |
| dsDNA | 200nM |
| sgRNA | 100nM |
| Cas9酶 | 1U |
| 10×Reaction Buffer | 2μL |
| RNase Free Water | To 20μL |
| 37℃反应1h，琼脂糖胶电泳检测 | |
*可在反应体系中添加20U的RNase Inhibitor，防止dsDNA不纯导致sgRNA的降解。
储存条件：-20℃
我公司销售的Cas9蛋白(Cas9核酸酶)报价，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具，今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作，仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒，如下图所示： 酶切系统 37 ℃, 3 hr；Run 1% gel，回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端，以利于下游 oligo 退火产物的连接；酶切时请充分，且绝对不能加 CIP 处理
选育新方法。而 CRISPR-Cas9 技术的出现，更是极大推动了微生物基因组编辑准确性和效率的提高。【背景】泓迅科技利用 CRISPR-Cas9 技术编辑酵母菌中的一个 920bp 的 ADE1 基因。ADE1 是腺嘌呤合成相关基因，如果 ADE1 失活，则细胞将会积累红色色素，呈现红色菌落。【方法】1、质粒构建2、sgRNA 活性检测3、挑选活性较高的 sgRNA 进行基因组定点编辑4、利用基因功能变化、表性变化和测序等方法检测基因定点修饰结果。【结论】1、从颜色表型变化得知，酵母菌落变成红色菌落，可知 ADE
方法（有视频），个人认为，自行查资料理解每一个元件的含义和作用，可以帮助更快的补充背景知识。通过将散落的知识点集合起来，最后拼凑成自己的知识地图。那么，为什么看起来好像这些 mRNA 都一样，怎么不只放一条完事了？不是滴。。。还有不一样的 mRNA。在学生信的时候，听到过一个词，「可变剪接」，有了初步印象之后，在这里才算是实实在在看到了，我认真的数了数，mRNA 画了 15 条，TP53 蛋白也画了 15 条。那么我们可以理解为，TP53 有 15 个亚型，当然，每个亚型都有自己的 mRNA。Step
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