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- 2025年12月04日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
40
- 英文名：
Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温
- 规格：
50ml*2|250ml*2
英文名称：Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit
产品规格：50ml*2|250ml*2
发货周期：1～3天
橙能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，与双链DNA结合后发出绿色荧光，溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。二者很容易判别。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：活细胞(VN)，核染色质着绿色并呈正常结构；早期凋亡细胞(VA)，核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状；晚期凋亡细胞(NVA)，核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状；非凋亡的死亡细胞(NVN)，核染色质着橘红色并呈正常结构。本产品AO、EB 溶液浓度分别为100ug/ml，所含稳定剂不影响实验效果。
使用方法：（仅供参考）
1、使用前先根据用量，将AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，现用现配。
2.1、对于贴壁细胞或爬片，去掉培养基，用 PBS 洗两遍去除残余培养基和未贴壁细胞，加入新的 PBS；如果需要观察全部细胞特性，保留未贴壁细胞，可以直接在培养基中加入工作液。按照每毫升培养基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室温放置 2-5min 后，用 PBS 洗 2 次，除去残余的荧光染料。加入新的 PBS 或培养基于荧光显微镜下观察即可。
2.2、对于悬浮细胞，可直接加入工作液或离心收集细胞后在 PBS 中加入工作液。按照每毫升培养基或 PBS 中加入 20ul 工作液即可。室温放置 2-5min 后，离心去除工作液，后用 PBS 洗 2 次，除去残余的荧光染料。加入新的 PBS 或培养基于荧光显微镜下观察即可。
3、建议用蓝光激发，视野下可以观察到死细胞呈现红色，活细胞呈现绿色。
保存：4℃避光密封保存，有效期一年。
AO-EB双染色试剂盒使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
糖皮质激素受体抗体英文全称propanoic acid英文简称PA检测范围4705nmol/L-8ng/ml
G蛋白偶合受体激酶1抗体英文全称zonulin antibody英文简称zonulin-Ab检测范围4706nmol/L-120ng/ml
促代谢型谷氨酸受体M3抗体英文全称Platelet-Derived Growth Factor receptor β英文简称PDGFRβ检测范围4707nmol/L-4000pg/mL
促代谢型谷氨酸受体5抗体英文全称Aspartate aminotransferase 1英文简称AST1；GOT1检测范围4708nmol/L-16ng/ml
生长调节致癌基因-1抗体GROa英文全称Aspartate aminotransferase 2英文简称AST2；GOT2检测范围4709nmol/L-10ng/ml
促胃泌素释放肽抗体英文全称Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4英文简称TNFRSF4检测范围4710nmol/L-2000pg/mL
葡萄糖调节蛋白78抗体（热休克蛋白70蛋白5）英文全称aconitase 1英文简称ACO-1检测范围4711nmol/L-20mg/mL
葡萄糖调节蛋白94抗体英文全称Mucin 4英文简称MUC4检测范围4712nmol/L-50ng/mL
糖原合酶激酶-3β抗体英文全称Sjogren syndrome antigen B英文简称SS-B检测范围4713nmol/L-8ng/mL
三磷酸鸟苷环水解酶抗体英文全称thymulin英文简称thymulin检测范围4714nmol/L-200ng/mL
G氨基丁酸B型受体2抗体英文全称solubility T cell immunoglobulin-and mucin-domain-containing molecule-3英文简称sTIM-3检测范围4715nmol/L-1000pg/mL
谷氨酸脱羧酶67抗体英文全称Cluster of differentiation 10英文简称CD10检测范围4716nmol/L-10ng/mL
生长抑制DNA损伤基因45抗体英文全称sCD14-ST英文简称sCD14-ST检测范围4717nmol/L-2000pg/mL
脑糖原磷酸化酶抗体英文全称Complement Bb英文简称CBb检测范围4718nmol/L-16ng/mL
G氨基丁酸受体3抗体英文全称cyclic adenosine monophosphate英文简称cAMP检测范围4719nmol/L-12pmol/mL
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文献和实验环境的安全与洁净。该产品已通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，不会造成任何环境污染。 EB (溴化乙啶）是早期分子实验中常用的小分子核酸凝胶染色剂，但染色效果并不灵敏，背景荧光信号太强，分辨率不高。最重要的EB是一种高诱变性致癌的化学物质。 SYBR Green I和 SYBR Gold 也被厂家宣传为灵敏的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解，稳定性差导致染色效果极不可靠。 SYBR
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的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解，稳定性差导致染色效果极不可靠。 SYBR safe 虽然被认为安全，但它的染色灵敏度远远达不到标准。 Goldview从对比试验结果来看，该产品就是AO（丫啶橙，一种剧毒致癌产品，且荧光亮度不佳）。请看Goldview 与 AO 对比试验结果。 下面看一下实验结果： 结果一： 图一结果显示：采用同样的样品及电泳条件（点泳池中跑4块25
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