酵母膜蛋白提取试剂盒北京厂家

特别提示：包括酵母膜蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：酵母膜蛋白提取试剂盒
英文名称：Yeast membrane protein extraction kit
产品货号：HR0109
产品规格：50T|100T

跨膜蛋白承担各种生物功能，膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构，因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
酵母膜蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。酵母膜蛋白提取试剂盒可以从各种酵母样本中提取膜蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，可用于各种下游实验。

储存条件：蛋白酶抑制剂-20℃保存；蛋白提取液2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便。
2．将蛋白提取的时间缩短至 1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒
使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

使用方法：
1．每500μl蛋白抽提液A中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。
2．取50ml酵母培养物，在4℃，2500g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
3．用冷PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．每100μl体积酵母沉淀物中加入500μl冷的酵母蛋白提取液，混匀后，在室温或37℃条件下振荡30-60分钟。
5．在2-8℃条件下于摇床混匀振荡15分钟。
6．将提取液在4℃条件下12000×g离心5分钟，取上清。
注：此时酵母已溶解于抽提液A，应无大量酵母菌体沉淀，若有大量未溶解酵母菌体，请延长步骤4和步骤5的振荡时间，振荡中途可用移液器吹打混匀。
7．在上清中加入5μl抽提液B，充分混匀。
8．在37℃水浴10分钟。
9．在37℃ 1000×g离心3分钟。
10．此时溶液分为2层，移除上层部分，小心吸取管底部下层部分大约50μl液体。
11．用50-100μl稀释液稀释该溶液，即得酵母膜蛋白样品。该样品可以用Bradford或BCA方法进行定量，调整相应的浓度用于下游实验。

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