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- 文献和实验
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36
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详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
50T|100T
中文名称:Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒
英文名称:
产品规格:50T|100T
发货周期:1~3天
产品背景:
细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。在体内,巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除,因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应,而在细胞坏死的过程中则常常伴随着炎症反应。
AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS 高亲和力特异性结合。PS 外翻发生在细胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相关蛋白出现之前,这使得Annexin V 与PS的结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件。
检测原理:
在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。
Annexin-Ⅴ能与PS 高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。用标记了PE的AnnexinⅤ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。细胞坏死的过程中也会发生细胞膜损伤,坏死的细胞会结合Annexin V-PE。
Annexin V-PE 通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋亡细胞。常用的染料是7-AAD。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的,核酸染料7-AAD 不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,7-AAD 能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。
7-AAD/Annexin V-PE试剂盒将AnnexinⅤ与7-AAD匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。坏死细胞可以同时与Annexin V-PE和7-AAD 结合显色,而7-AAD 则被排除在活细胞(PE阴性)和早期凋亡细胞(PE阳性)之外。在没有巨噬细胞的情况下,凋亡的最后阶段会像细胞坏死一样发生整个细胞的解体,从而使凋亡晚期的细胞也同时被PE和7-AAD 结合染色呈现双阳性。
储存条件:染色液2-8℃避光保存;结合液2-8℃保存;长期不用-20℃保存。
Annexin V-PE染色液避免反复冻融,冻融2次以上可能会失效。长期保存分装后-20℃保存。
有效期:一年。
Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些:
1.显微技术:包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术:离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程:细胞培养。
注意事项:
1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶,反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,为取得良好的使用效果,*次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中,可能会导致检测试剂中出现少量沉淀,此时宜平衡至室温,并尽量溶解。如仍有残留的不溶物,可以离心去除后使用,经测试不会影响后续的检测效果。
2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。
3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法,实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。
FK506结合蛋白38抗体英文全称Feline calicivirus antibody英文简称FCV Ab检测范围4030nmol/L-800ng/mL
叉头蛋白O1/O3/O4抗体英文全称soluble amyloid precursor proteinβ英文简称sAPPβ检测范围4031nmol/L-160ng/mL
尤文肉瘤FLI1蛋白抗体英文全称Gi;o英文简称Gi;o检测范围4032nmol/L-800pg/mL
FEM1B抗体英文全称PPD IgG Antibody英文简称PPD-IgG Ab检测范围4033nmol/L-24ng/L
纤维母细胞生长因子3抗体英文全称PPD IgM Antibody英文简称PPD-IgM Ab检测范围4034nmol/L-36ng/L
纤维母细胞生长因子4抗体英文全称apoprotein H英文简称apo-H检测范围4035nmol/L-120μg/mL
FRA-1蛋白抗体英文全称apoprotein H Antibody英文简称apo-H Ab检测范围4036nmol/L-120μg/mL
FLAG Tag标签抗体(N端)英文全称Carbohydrate Antigen 153英文简称CA153检测范围4037nmol/L-48ng/mL
成纤维细胞生长因子8抗体英文全称Chemokine like factor 1英文简称CKLF1检测范围4038nmol/L-64ng/mL
成纤维细胞生长因子受体2抗体英文全称MTT英文简称MTT检测范围4039nmol/L-8ng/L
成纤维细胞生长因子受体4抗体英文全称L-3-Hydroxyacyl-CoA dehydrogenases英文简称L-3-HCoAdh检测范围4040nmol/L-320U/L
凝血酶原酶(纤维介素)抗体英文全称acyl CoA dehydrogenases英文简称acyl-CoAdh检测范围4041nmol/L-480U/L
衰老关键蛋白抗体英文全称Progranulin英文简称PGRN检测范围4042nmol/L-2000pg/mL
凋亡调节基因之一抗体英文全称Cytochrome P450 Side Chain Cleavage Enzyme英文简称P450scc检测范围4043nmol/L-160U/L
凋亡调节基因之一抗体(短型)英文全称membrane-bound HLA-G英文简称mHLA-G检测范围4044nmol/L-8000pg/mL
一站式真菌mRNAoutAURKC rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
一站式磁珠法真菌mRNA提取试剂盒PITX3 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
mRNA提取试剂盒HTRA1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
磁珠法mRNA提取试剂盒ART4 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
Oligo(dT)纤维素ARHGAP4 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒人视网膜星形胶质细胞 英文名称:HRA请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
人小神经胶质细胞 英文名称:HM请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
人雪旺细胞 英文名称:HSC请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
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文献和实验Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。 图Annexin V 检测细胞凋亡原理二、试剂盒组份
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