Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)产品图

Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)

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  • 上海一研
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  • 2025年11月26日
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    • 英文名

      Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海一研

    • 保存条件

      低温

    • 规格

      20T

    中文名称:Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)
    英文名称:Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric

    产品规格:20T
    发货周期:1~3天
    Caspase 3,即Cysteine-requiring Aspartate Protease 3,也称CPP32、Yama或apopain,属于Caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily),系一种在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶,也是哺乳动物细胞中研究最多的一个Caspase。 Caspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9,且可以直接特异性剪切多种Caspase底物,包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)、ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。这些由Caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外,caspase 3在细胞核凋亡和细胞起泡(Cell blebbing)过程中也起到了关键作用,包括染色质固缩(chromatin condensention),DNA片段化(DNA fragmentation)等。
    Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric是一款简单快速检测细胞或组织内Casepase 3活性的试剂盒,其检测原理是基于Casepase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),pNA在405nm附近有强吸收,从而可以通过测定吸光度来检测Caspase 3的活性(黄色产物与Caspase 3酶的活性成正比)。 另外,本试剂盒中还提供了Caspase 3催化产生的黄色产物pNA,以此作为定量caspase 3酶活性的标准品。
    试剂盒组份:
    Lysis Buffer裂解液————8ml
    Assay Buffer检测缓冲液——8ml
    Ac-DEVD-pNA(2mM)—————200μl
    pNA(10mM)————————200μl
    储存条件:-20℃使用说明 
        1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。 
        2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。 
        3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物; 
        4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;   
        5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。  
        6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。

    产品细节图片1
    Caspase 3活性检测试剂盒(比色法)使用注意事项
    1. 微量试剂取用前请离心集液。
    2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
    3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
    4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
    5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
    6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
    7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
    干细胞生长因子受体/细胞表面分化抗原抗体英文全称Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin2英文简称AFP-L2检测范围1900nmol/L-32ng/mL

    轴突相关粘附分子抗体英文全称gluose英文简称GLU检测范围1901nmol/L-8mmol/L
    钙平衡调节蛋白1抗体英文全称Fasting insulin英文简称FINS检测范围1902nmol/L-24mIU/L
    阿尔茨海默病淀粉样蛋白相关胶原蛋白抗体英文全称14,15-DHET英文简称14,15-DHET检测范围1903nmol/L-2000pg/mL
    老年痴呆相关类钙粘蛋白CS1抗体英文全称papillomavirus 16 IgG antibody英文简称HPV16 IgG Ab检测范围1904nmol/L-
    辅酶Q10B抗体英文全称papillomavirus 18 IgG antibody英文简称HPV18 IgG Ab检测范围1905nmol/L-
    细胞因子受体样因子1抗体英文全称homocysteine thiolactone英文简称HTL检测范围1906nmol/L-8ng/mL
    半胱氨酸亚磺酸脱羧酶抗体英文全称membraneIgD英文简称mIgD检测范围1907nmol/L-80μg/mL
    神经网蛋白CopineVI抗体英文全称melanocyte IgG antibody英文简称MC IgG Ab检测范围1908nmol/L-40ng/mL
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