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Caspase 9分光光度法检测试剂盒

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  • 上海一研
  • EY-19073
  • 进口、国产
  • 2025年11月23日
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    • 英文名

      Caspase-9 Colorimetric Assay Kit

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海一研

    • 保存条件

      低温

    • 规格

      20T|50T|100T

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    中文名称:Caspase 9分光光度法检测试剂盒
    英文名称:Caspase-9 Colorimetric Assay Kit

    产品规格:20T|50T|100T
    发货周期:1~3天
    本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织caspase-9 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用。Caspase-9 是级联酶的上游分子,可被线粒体向细胞质释放的细胞色素C 激活。激活的Caspase-9 可引起下游级联酶的活性,如Caspase-3。Caspase-9 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;但在细胞发生凋亡阶段时则被激活。Caspase-9 分光光度法检测试剂盒就是将caspase-9 序列特异性的多肽偶联至发色基团,当该底物被caspase-9 剪切后,发色基团即游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,可考察caspase-9 的活化程度。
    注意事项
    1. Caspase-9 Substrate 避光保存及使用。
    2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-9 活化的机制,这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-9 活性无明显改变,需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
    3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50-100mg,以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求,因为Caspase-9 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关,如测定的OD 值偏低,可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。


    产品细节图片1
    Caspase 9分光光度法检测试剂盒使用注意事项
    1. 微量试剂取用前请离心集液。
    2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
    3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
    4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
    5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
    6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
    7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
    使用说明 
        1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。 
        2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。 
        3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物; 
        4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;   
        5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。  
        6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
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    防御素β1/Defensin β1抗体英文全称Heparan sulfate英文简称HS检测范围1151nmol/L-800nmol/L
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