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- 详细信息
- 文献和实验
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30
- 英文名:
Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
10T|20T|50T|100T
英文名称:Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
产品规格:10T|20T|50T|100T
发货周期:1~3天
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素PE 标记,以标记了的Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。
7-AAD(7-amino-actinomycin D)是一种核酸染料,它不能通过正常质膜,随着细胞凋亡、细胞死亡过程,质膜对7-AAD 的通透性逐渐增加,结合细胞凋亡中DNA 的有控降解,在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光,通过7-AAD 标记DNA 的强弱,将细胞分为三群:7-AAD 强为死亡细胞,7-AAD 弱是凋亡细胞,7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD 同PI 有着相似的荧光特性,但其发射波谱较PI 窄,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI 的最佳替代品,可与Annexin V-PE 联合使用。
本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
Annexin V-PE/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
血清白蛋白单克隆抗体英文全称Titin antibody英文简称Titin Ab检测范围865nmol/L-8ng/mL
磷酸化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体英文全称CD19 Antibody英文简称CD19 Ab检测范围866nmol/L-20ng/mL
AEG-1抗体英文全称Vitamin D25英文简称VD25检测范围867nmol/L-40ng/mL
肌动蛋白相关蛋白2/3亚型1A抗体英文全称Glycine Dehydrogenase英文简称GLDC检测范围868nmol/L-240U/L
锚蛋白重复结构域蛋白32抗体英文全称MOG-Ab英文简称MOG-Ab检测范围869nmol/L-80IU/L
共济失调7样蛋白3B抗体英文全称ESBL英文简称ESBL检测范围870nmol/L-64U/L
感染性蛋白唯一蛋白1抗体英文全称application estimate英文简称AE检测范围871nmol/L-8ng/mL
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族5抗体英文全称Pro-neurotensin英文简称Pro-NT检测范围872nmol/L-120pmol/L
植物生长激素ABP1抗体英文全称13(S)-HODE英文简称13(S)-HODE检测范围873nmol/L-8ng/mL
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族8抗体英文全称myelin oligodendrocyte glycoprotein英文简称MOG检测范围874nmol/L-200ng/mL
肌动蛋白相关蛋白1抗体英文全称NLRP3 Inflammasome英文简称NLRP3检测范围875nmol/L-160pg/mL
α红细胞分化相关因子抗体英文全称Uu Casset IgM Antibody英文简称Uu Casset IgM检测范围876nmol/L-8000ng/mL
血管紧张素激活蛋白1抗体英文全称Traf2 binding protei英文简称T2BP检测范围877nmol/L-100ng/mL
脱氧胞苷脱氨酶蛋白抗体英文全称Complement factor H-related protein 1英文简称CFHR1检测范围878nmol/L-800ng/mL
alpha 1能受体B抗体英文全称14-3-3 pro英文简称14-3-3 pro检测范围879nmol/L-80ng/mL
甲蓝-DNA酶琼脂100克Toluidine Blue-O-Dnase Agar用于核糖核酸酶测定
中国蓝蔷薇酸琼脂250克中国蓝蔷薇酸琼脂
溶脲支原体快速培养基1人份/1支UU MediumBR
溶脲支原体培养基100毫升UU MediumBR
溶脲支原体抗体1盒UU AntibodyBR
YT肉汤250克YT BrothBR
Annexin V-PE/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒Semen cuscutae菟丝子PCR鉴定试剂盒 中文名称 AKIRIN2蛋白抗体别 名 AKIR2_HUMAN; AKIRIN 2; Akirin-2; Akirin2; C6orf166; dJ486L4.2; FBI1; FLJ10342; Fourteen three three beta interactant 1.研究领域 细胞生物 免疫学 染色质和核信号 信号转导 表观遗传学蛋白分子量 predicted molecular weight: 22kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AKIRIN2
Semen vaccariae王不留行PCR鉴定试剂盒 中文名称 ADP核糖基化样因子8B抗体别 名 ADP ribosylation factor like 10C; ADP-ribosylation factor-like protein 10C; ADP-ribosylation factor-like protein 8B; ARL10C; ARL8B; ARL8B_HUMAN; FLJ10702; Gie1; Novel small G protein indispensable for equal chromosome segregation 1.研究领域 细胞生物 细胞周期蛋白 细胞分化 表观遗传学蛋白分子量 predicted molecular weight: 22kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ARL8B
Radix clematidis威灵仙PCR鉴定试剂盒 中文名称 三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体别 名 AAA nuclear coregulator cancer-associated protein; ANCCA; Atad2; ATAD2_HUMAN; ATPase family AAA domain containing 2; ATPase family AAA domain containing protein 2; ATPase family AAA domain-containing protein 2.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导 表观遗传学蛋白分子量 predicted molecular weight: 158kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATAD2
Galla chinensis五倍子PCR鉴定试剂盒 中文名称 AKIRIN1蛋白抗体别 名 AKIRIN 1; C1orf108; FLJ12666; OTTHUMP00000008669; RP11-781D11.2; STRF2; AKIR1_HUMAN.研究领域 细胞生物 免疫学 表观遗传学蛋白分子量 predicted molecular weight: 22kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AKIRIN1
Scolopendra蜈蚣PCR鉴定试剂盒 中文名称 锚定蛋白样蛋白1抗体别 名 Ankyrin repeat, SAM and basic leucine zipper domain containing protein 1; Ankyrin repeat, SAM and basic leucine zipper domain containing protein 1; ALP1; ANKL1; Ankyrin like protein 1; ASZ 1; ASZ1_HUMAN.研究领域 肿瘤 心血管 细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞周期蛋白 激酶和磷酸酶 细胞分化蛋白分子量 predicted molecular weight: 53kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ASZ1
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
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