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大量
- 英文名:
CHAPS Lysis Buffer(CHAPS裂解液)
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
4-25℃
- 规格:
250mL
| 名称 | 编号 | 规格 | 价格 |
| CHAPS Lysis Buffer(CHAPS裂解液) | YB-01380-25 | 250mL | 390元 |
| 英文名称:CHAPS Lysis Buffer(CHAPS裂解液) 运输:常温 保存:4-25℃ 有效期:2年 货期:1-3天 其他: 产品介绍: 本公司定制各种即用型溶液欢迎来电咨询。 |
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pH缓冲液显示pH跟正常值差距过大
需要按仪器说明用标准缓冲溶液标定仪器,标定方法如下:
1)仪器预热后接上复合电极;
2)将选择开关调到PH档;
3)调节温度补赏旋钮白线对准溶液温度值(室温);
4)斜率调节旋钮顺时针旋到底;
5)把清洗过的擦净的电极插入标准PH缓冲溶液中;
6)调节定位旋钮使仪器读数与该缓冲溶液当时温度下的PH值一致。
每一次测定后都必须用蒸馏水将电极洗净,用擦镜纸将电极表面的水吸干。
经过正常标定后,再反过来测标准缓冲溶液的PH值时,数据不会出现异常。
测定缓冲溶液ph值时为什么理论值与测量值误差较大
看看仪器和样品.一般不存在可见值和理论值.都是未知值.如果经常测 出现较大差距.要先看看 仪器和样品.使用PH计时用中性(6.86)定位,再根据被测样品的酸碱性选择4.01或9.18的标定.之所以用标准溶液定位,原因是我们用已知pH值的缓冲溶液将pH计校正到该pH下,才会使测定的样品准确度高.
pH值测定法的注意事项
(1)测定前,按各品种项下的规定,选择二种pH值约相差3个单位的标准缓冲液,使供试液的pH值处于二者之间。(2)取与供试液pH值较接近的第一种标准缓冲液对仪器进行校正(定位),使仪器示值与表列数值一致。(3)仪器定位时,再用第二种标准缓冲液核对仪器示值,误差应不大于±0.02pH值单位。若大于此偏差,则应小心调节斜率,使示值与第二种标准缓冲液的表列数值相符。重复上述定位与斜率调节操作,至仪器示值与标准缓冲液的规定数值相差不大于0.02pH单位。否则,须检查仪器或更换电极后,再行校正至符合要求。(4)每次更换标准缓冲液或供试液前,应用纯化水充分洗涤电极,然后将水吸尽,也可用所换的标准缓冲液或供试液洗涤。(5)在测定高pH值的供试品时,应注意碱误差的问题,必要时选用适用的玻璃电极测定。(6)对弱缓冲液(如水)的pH值测定,先用邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液校正仪器后测定供试液,并重取供试液再测,直至pH值的读数在1分钟内改变不超过±0.05为止;然后再用硼砂标准缓冲液校正仪器,再如上法测定;二次pH值的读数相差应不超过0.1,取二次读数的平均值为其pH值。(7)配制标准缓冲液与溶解供试品的水,应是新沸过的冷蒸馏水,其pH值应为5.5~7.0。(8)标准缓冲液一般可保存2~3个月,但发现有浑浊、发霉或沉淀等现象时,不能继续使用。除另有规定外,水溶液的pH值应以玻璃电极为指示电极,用酸度计进行测定。酸度计应定期检定,使精密度和准确度符合要求。
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文献和实验9M Urea,2.5mM EDTA,2.5mM EGTA,1% DTE,4% CHAPS make 10ml and aliquot 10x1ml,freeze at -70℃ Lysate preparation wash the cells 2x with PBS wash the cells 1x with 10mM Tris,250mM Sucrose lyse the cells with 100 – 350μl of urea lysis buffer
,三个一起上 从以上三个结果可以看到,第一种孵育方法抗原得率最高,第三种抗原得率最低。如果靶蛋白丰度较高,第一种和第二种差别并不显著。注意,整个体系选择同样的孵育顺序,以确保结果的重复性。 5、各种 buffer 整个 co-IP 系统,涉及到裂解液,结合液,洗涤液,洗脱液,这4种溶液要如何考量呢? 裂解液---样本质量很大程度受限于裂解液,要考虑其中的去垢剂种类。 非变性裂解液,含有非离子型去垢剂,有助于稳定天然蛋白构象,比如 IP lysis buffer。不建议使用变性裂解液
进行实验,则磷酸化 c-Src 丢失[4] 。就是说使用溶液法提取的蛋白谱是不完整的,蛋白有非等比例的丢失,内参也有可能存在丢失情况,那么如果做磷酸化蛋白定量,就会出现数据偏差。β整联蛋白是一种磷酸化蛋白,使用 Chaps 进行原代鸡胚成纤维细胞蛋白质提取,Chaps 不可溶组分使用 RIPA 裂解液再次提取,RIPA 不可溶组分再使用 sample buffer 提取,在五次采样(见下图)中,在 Chaps 不可溶组分和 RIPA 不可溶组分中都发现了大量的整联蛋白[5] 。caveolin
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