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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存:
16
- 英文名:
B834感受态细胞
菌株类型: E.coli
培养基: LB培养基
生长条件: 37 ℃, 有氧
基因型: B834感受态细胞基因型
抗性: 无抗
质粒转化条件: 42 ℃ 热激
应用: 蛋白表达
诱导方法: IPTG
B834感受态细胞
菌株特点:
B834是BL21菌株的父系菌株。该系列宿主菌是蛋氨酸缺陷型,可以用来高水平,高特异性的使用35S-蛋氨酸和硒代蛋氨酸标记目的蛋白,进行蛋白质晶体结构研究。B834宿主菌也是lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株。
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文献和实验The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne
一、材料与试剂 1. SOBor2xYT2. MES3. 足够80个管子的TFB(50 mL)/400转化DMSO4. 5 M NaCl 二、仪器 1. 离心机 三、步骤 1. 室温下在5 ml SOB或2×YT中接种菌并且培养过夜。2. 加过夜培养的菌到500 ml 的SOB或2×YT,其装在4L瓶中以最大限度的透气。加入36 ml 5 M 的NaCl,在30℃下培养。3. 大约3 h,OD600达到0.5。4. 离心细胞。取沉淀,吸取
野生型 E.coli 并不容易转化,这是由于细菌产生一种酶能迅速降解进入的外源 DNA 。经过多年的努力,科学家们发现了一种方法可以增加细胞吸收外源 DNA 的效率。那就是用化学方法处理细胞,使其改变膜对 DNA 的通透性。这种细胞就称为感受态细胞,即细胞处于能摄入核酸分子时的生理状态。这种方法已经成为基因工程的常规技术,它对于我们利用体外 DNA 重组技术来了解真核和原核生物的基因功能特别重要。细菌的转化有两种类型:一种是自然转化( natural transformation
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