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上海研生
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20
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详见说明书
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
资源名称 U-87 MG说明书
种属 人脑星形胶质母细胞瘤
类型 脑星形胶质母细胞瘤
形态 上皮细胞
培养方法
培养基 MEM培养基(GIBCO,货号41500034,添加NaHCO3 1.5g/L,Sodium Pyruvate 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。
详细说明
动物种别 人
性别 女
描述 这是1966年至1969年间J. Ponten和同事从恶性神经胶质瘤中构建的细胞株中的一株(其它包括ATCC HTB-15, ATCC HTB-16
细胞培养的优点:
1.U-87 MG说明书研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
收到U-87 MG说明书如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
HPLC≥98%5羟二十碳四烯检测试盒5mgBMP-8A
HPLC≥98%3-葡萄糖苷孕二检测试盒5mgGADA65-Ab
BLNK英文名称:ADCY3豚鼠胆脂酶(CHE)免疫试剂盒
HPLC≥98%5核苷酶检测试盒5mgGDF6
HPLC≥98%Ⅱ型前胶原羧端肽检测试盒5mgGAD65-IgG
Phospho-BLNK (Tyr96)英文名称:Angiomotin豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫试剂盒
HPLC≥98%5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亚检测试盒5mgNRGN
HPLC≥98%Ⅱ型前胶原N端前肽检测试盒5mgCN
Bcr英文名称:Adenovirus 5 E1A豚鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒
U-87 MG说明书进口、国产15mg
NDUFAF4 激调节增值细胞相关蛋白体进口/国产SAMHD1/HDDC1/MOP5 单核细胞蛋白5体
CD59英文名称:phospho-ATF2 (Thr55)人基二免疫试剂盒
Enalapril Maleate进口、国产76095-16-4200mg
NCX1/SLC8A1 钠钙交换蛋白1体进口/国产beta-Amyloid(1-40) β淀粉样肽(1-40)体
Cyclin E英文名称:ADRA1B人肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)免疫试剂盒
进口、国产ea
NDUFS1/NADH dehydrogenase (ubiquinone) FeS protein 1 (75kD) 线粒体复合物NDUFS1蛋白体进口/国产HDDC3 四鸟苷水解酶体
C7ORF50英文名称:Bcl-2 alpha人醇脱氢酶(ADH)免疫试剂盒
公司优势:
1.具有多年的销售经验和资深的行业背景,我司秉承质量优先的理念,重视自主创新,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。
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文献和实验Zymolyase Dissolve in 10% glucose. Store aliquots (25 µl) at 20o C in common freezer for stock solutions Use once and dispose Comments: alternative is to dissolve in SCE, 40% gycerol, 20 mg/ml final. Can use
Oxalyticase Dissolve in 0.1 M NaCl, 0.02% Na azide, 50% glcyerole Store aliquots (1 ml) at 20o C in common freezer for stock solutions 上一篇:ALPHA FACTOR ARREST AND RELEASE 下一篇:GLASS BEADS
摘 要一、人成骨肉瘤MG-63细胞株和成人成骨细胞的培养与分化特性的观察目的:观察人成骨肉瘤MG-63细胞株和正常成人成骨细胞分化的特性。方法:在细胞培养的不同时间,用α-磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;放射免疫法测定骨钙素(BGP)含量;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测I型胶原、MMP-1、TIMP-1基因mRNA表达;Van GieSon氏苦味酸酸性复红染色法染色细胞I型胶原。结果:人成骨肉瘤MG-63细胞株接种培养第7天后I型胶原基因表达较高。MMP-1表达量随时间
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