生物素标记抗体

生物素亲和素 ELISA 系统介绍

生物素亲和素(又称抗生物素)系统(biotin avidin system,BAS)标记抗体的技术是 20 世纪 70 年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。 由于亲和素与生物素间的亲和力极强，结合迅速，且极其稳定，生物素标记抗体和酶的标记率高，又不影响蛋白的活性，使 BAS 标记技术比常规酶联免疫、放射免疫及荧光免疫技术有着更高的灵敏度，为微量抗原、抗体的检测开辟了新的途径。近年来，在 BAS 检测中多用链霉亲和素“streptavidin,SA”，它是链霉菌培养过程中的分泌物，完整的链霉

　抗生物素

试剂 时，应注意厂家和批号，对购进试剂应进行事先测试，以保证实验结果的稳定性。 ③ABC试剂保存温度以4℃为佳，据报告保存可达两年之久，仍能获得满意效果，而在―20℃生物活性在短期内即被破坏。 2．桥抗生物素―生物素技术（Bridged Avidin �Biotin technique, 简称BRAB技术） 该技术方法是用生物素分别标记抗体和酶，然后以抗生物素为桥，把两者连接起来（图6-2）。 图

荧光素FITC标记抗体的方法

当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般最多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体，也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark