ATCC CRL-2854(WPMY-1)人正常前列腺基质永

细胞名称:       ATCC CRL-2854(WPMY-1)人正常前列腺基质永生化细胞,WPMY-1细胞,WPMY1细胞

种属来源:       人

组织来源:       前列腺基质

疾病特征:       正常

细胞形态:       成肌纤维细胞样

生长特性:       贴壁生长

培 养 基:       DMEM培养基，95%；FBS，5%。

生长条件:       气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37  ℃,

传代方法:       1：2至1：6，每周2次。

冻存条件:       90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存

支原体检测:       阴性

安全等级:       2

应    用:       该细胞对WPMY-1细胞旁分泌和间质的研究特别有用：上皮细胞间的相互作用。

同工酶:
AK-1, 1
ES-D, 2
G6PD, B
GLO-I, 1-2
Me-2, 0
PGM1, 2
PGM3, 1

参考文献:
Bello D, et al. Androgen responsive adult human prostatic epithelial cell lines immortalized by human papillomavirus 18. Carcinogenesis 18: 1215-1223, 1997. PubMed: 9214605
Webber MM, et al. Acinar differentiation by non-malignant immortalized human prostatic epithelial cells and its loss by malignant cells. Carcinogenesis 18: 1225-1231, 1997. PubMed: 9214606
Webber MM, et al. Prostate specific antigen and androgen receptor induction and characterization of an immortalized adult human prostatic epithelial cell line. Carcinogenesis 17: 1641-1646, 1996. PubMed: 8761420
Okamoto M, et al. Interleukin-6 and epidermal growth factor promote anchorage-independent growth of immortalized human prostatic epithelial cells treated with N-methyl-N-nitrosourea. Prostate 35: 255-262, 1998. PubMed: 9609548
Webber MM, et al. Immortalized and tumorigenic adult human prostatic epithelial cell lines: characteristics and applications. Part I. Cell markers and immortalized nontumorigenic cell lines. Prostate 29: 386-394, 1996. PubMed: 8977636
Webber MM, et al. Immortalized and tumorigenic adult human prostatic epithelial cell lines: characteristics and applications Part 2. Tumorigenic cell lines. Prostate 30: 58-64, 1997. PubMed: 9018337

特点和简介
肌成纤维基质细胞株, WPMY-1, 与RWPE-1 cells (ATCC CRL-11609)一样，来源于同一张成人前列腺组织切片的周围区域的基质细胞。 通过一个pRSTV质料结构，用SV40大T抗原对基质细胞进行永生化。 WPMY-1细胞，与RWPE-1细胞及其它上皮细胞衍生株一样，属于来源于同一个前列腺的一系列细胞株。 由于它们来源于同一个前列腺的周围区域，WPMY-1细胞株对于研究分泌和基质与上皮细胞相互作用尤其有用。 据提供者报道，来源于同一个前列腺的RWPE-1细胞株(ATCC CRL-11609)，经过检测，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈阴性。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。

ATCC CRL-2854(WPMY-1)人正常前列腺基质永生化细胞接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养 基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联 系。

培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然 后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养 过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。       
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶 中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落 ，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中 或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞， 根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻 存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时 以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

ATCC CRL-2854(WPMY-1)人正常前列腺基质永生化细胞培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述 现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、 所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户 自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细 胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴 壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜 培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为 您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培 养，待细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细 胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系 ，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。