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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3个月~12个月
- 英文名:
pECMV-3×FLAG-ATP5PO质粒
- 库存:
41
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验4 %SDS 0.2 % 溴酚蓝 20 % 甘油 三、实验方案 1、外源基因的诱导表达 (1 )用适当的限制性内切核酸酶消化载体DNA 和目的基因。 (2 )按连接步骤连接目的基因和载体,并转化到相应的宿主菌。 (3 )筛选出含重组子的转化菌落,提取质粒DNA 作限制性内切核酸酶图谱,DNA 序列测定, 确定无误后进行下一步。 (4 )如果表达载体的原核启动子为PL 启动子,则在30 -32 ℃ 培养数小时,使培养液的OD600达0.4-0.6 ,迅速使温度升至42 ℃ 继续
的有温度诱导和药物诱导。本实验采用异丙基硫代-β-D-半乳糖昔(IPTG)诱导外源基因表达。 不同的表达质粒 表达方法并不完全相同,因启动子不同,诱导表达要根据具体情况而定。 二、材料 1、诱导表达材料 (1 )LB (Luria—Bertani))培养基 酵母膏 (Yeast extract)5g 蛋白胨 (Peptone)10g NaCl10g 琼脂 (Agar)1-2% 蒸馏水 (Distilled
两个阶段,以减轻宿主菌的负荷。常用的有温度诱导和药物诱导。本实验采用异丙基硫代-β-D-半乳糖昔(IPTG)诱导外源基因表达。 不同的表达质粒 表达方法并不完全相同,因启动子不同,诱导表达要根据具体情况而定。 二、材料 1、诱导表达材料 ( 1 ) LB (Luria—Bertani))培养基 酵母膏 (Yeast extract) 5g 蛋白胨 (Peptone) 10g NaCl 10g 琼脂 (Agar
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