酒石酸长春瑞滨杂质Ⅰ（4-氧-去乙酰基长春瑞滨二酒石酸盐）

电化学脱氧核糖核酸传感器进展

修饰电极。 　　自组装膜法制得的DNA修饰电极，表面结构高度有序，稳定性好，有利于杂交，但对巯基化合物修饰的DNA的纯度要求较高，分离提纯操作较繁琐。 2.2　共价键合法 　　共价键合法一般分2步进行。第1步是电极的活化预处理，以引入活性键合基团；第2步进行表面的有机合成，通过共价键合反应把探针分子修饰到电极表面。 　　Millan等［12］研究发现，在氧化的玻碳电极表面，以一种水溶性的乙基-(3-二甲基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-烃基磺基琥珀酰亚胺(NHS)作偶联活化

分子生物学常用实验技术（page 2)

电泳分析(先用苯酚抽提),另10μl 进行同位素掺入放射性活性测定。第一链合成eppendorf 管可直接用于第二链合成 　　注：以上25μl 反应总体积中所用RNA 量为1μg,如合成5μg RNA,则可按比例扩大反应体积, 倒5μg RNA 使用125μl 总体积进行合成。 （二） 第二链合成 1、取第一链反应液20μl, 再依次加入10×第二链缓冲液20μ　　lDNA 聚合酶Ⅰ 23μ　　RNase H 0.8μH2O 　　加至终体积为100μl 2、轻轻混匀,如需

影响PCR的主要因素

聚合酶，并且得到了DNA聚合酶Ⅰ纯品。DNA聚合酶Ⅰ是由分子量为109000的一条多肽链构成，此酶可被枯草杆菌蛋白酶分解为两个片段，一个片段分子量为76000，有聚合酶活性，并有3’→5外切酶活力，即Klenow片段（Klenow fragment）。另一个片段分子量为34000，具有5’→’3’外切酶活力。因此，DNA聚合酶具有几种功能：一是聚合作用，以DNA为模板，将dNTP中的脱氧单核苷酸逐个加到3-OH末端。二是有’3’→5’外切酶活力，能识别和消除错配的引物末端，与复制过程中校正功能有关。三是5’→