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- ZJS-2980
- 2025年08月13日
企业认证
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
阴凉处，避光
- 英文名：
Caprylic Acid
- 供应商：
上海羽朵生物
- CAS号：
124-07-2
- 规格：
0.25ml
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文献和实验该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。 一、材料和试剂 1. 正辛酸。 2. 60mmol/L，pH4.0醋酸缓冲液，PBS。 3. 透析袋。 4. 高速低温离心机。 二、操作步骤 1. 将待提取样品用60mmol/L，pH4.0醋酸缓冲液稀释3～4倍，调pH至4.5，对含脂质较高的标本可采用二氧化硅粉或玻璃纤维吸附法除去脂质。 2. 在室温下边搅拌边缓慢加入正辛酸，按每ml样品中加25μl，若样品体积
铵溶液，边滴加边摇匀，然后置于2到8摄氏度静置2小时。 将步骤e中的待分离物于离心机内离心，8000r/min离心15到20分钟，除上清。 将步骤f中离心后的沉淀用1ml 0.01M PBS 溶解, 转移到MD 14000透析袋内，用0.01 M PBS进行透析，透析4次以上，每次至少1小时以上。 2.正辛酸-饱和硫酸铵沉淀法该纯化方法原理是：正辛酸在偏酸条件下，能与抗血清中或者小鼠腹水中的杂蛋白结合，在等电点附近将其沉淀，IgG类抗体则存在于上清液中，再利用饱和硫酸铵沉淀法即可进一步提纯。 具体
%饱和硫酸铵沉淀也可以。 相对于硫酸铵两步沉淀法，辛酸-硫酸铵两步沉淀法得到的抗体更纯。辛酸-硫酸铵两步沉淀法的原理是：辛酸是一种有机酸，在酸性条件下(pH 4.5)，可以使大分子蛋白质沉淀，尤其是PI值在4.5附近的白蛋白，将这些杂蛋白用辛酸沉淀完毕后，再用法将抗体沉淀下来即可。 具体操作： （1）将腹水用0.06 M醋酸钠(pH4.0）按1：3稀释，在4 ℃条件下搅拌加入正辛酸，一般按每毫升未稀释的腹水加入40 ul正辛酸，然后4 ℃静置2 h; （2）4 ℃10000
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