- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
阴凉处,避光
- 英文名:
4,4'-Bis(3-methyl-1-Phenyl-5-Pyrazo lone)
- 供应商:
上海羽朵生物
- CAS号:
7477-67-0
- 规格:
50mg
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文献和实验你是否苦于你纯化的标签蛋白无法达到理想纯度而日夜发愁?是否在换了新的标签后仍不太满意而承受老板们鬼畜般的霹雳大吼?朋友别哭,相信这篇文章可以为你带来纯化高纯度蛋白的新思路。 进行蛋白质功能研究的关键在于得到高纯度蛋白。习惯于构建单标签的你想必遇到过杂质太多,蛋白表达量少甚至不稳定的情况。何不根据目的蛋白性质构建双标签蛋白进行两种不同亲和层析柱的纯化?没准会有意想不到的效果。 01双标签蛋白助力于目的蛋白的高特异性 单组氨酸标签蛋白的亲和层析结果通常不能保证杂蛋白的有效去除
mM magnesium acetate, 50 mM potassium acetate, 1 mM DTT (pH 7.9 at 25℃).双酶切连接反应的经验谈: 双酶切:1、在双酶切载体时如果2个酶切位点靠得很近,必须注意酶切顺序。因为有的限制性内切酶要求其识别序列的两端至少保留有若干个碱基才能保证酶的有效切割。有的酶要求识别序列两端有多个碱基的,则必须先切,否则就可能造成酶切失败。2、回收PCR产物:回收的PCR产物片段=1:10 ,一般取前者0.03pmol,后者取0.3pmol
1、 在双酶切载体时如果2个酶切位点靠得很近,必须注意酶切顺序。因为有的限制性内切酶要求其识别序列的两端至少保留有若干个碱基才能保证酶的有效切割。有的酶要求识别序列两端有多个碱基的,则必须先切,否则就可能造成酶切失败。 2、 回收PCR产物:回收的PCR产物片段=1:10 ,一般取前者0.03pmol,后者取0.3pmol。pmol为单位的DNA转换为为?g单位的DNA:(X
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