- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
阴凉处,避光
- 英文名:
3’-chloro-3’-deoxythymidine
- 供应商:
上海羽朵生物
- 规格:
50mg
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文献和实验这周讨论一项常用的技术,即使常用但仍引起部分人核酸分离焦虑症。那就是基因组DNA的纯化去杂质。 场景是这样的:你有一份采自南太平洋中部一个偏僻小岛上首次发现的古老兰花品种根际土壤样品。你使用了非PowerSoil Kit法提取其中的微生物DNA。最终DNA含有太多杂质,无法PCR扩增。因此需要去除腐植酸等PCR抑制因子。你需要所有的核酸分子通过全基因组鸟枪测序……怎么办? 你致电MO BIO说了你的大概情况,而我们推荐了使用PowerClean Kit
杂质对于RNA最后质量弊大于利。 结论: 1 杂带是hnRNA残余(另有《RNA研究方法》(Robert E。Farrell。Jr)中相关章节描述支持) 2 用Trizol或者酚氯仿抽提两次可以有效去除多出的带
,可以帮助去掉一些无法降解的组织,比如纤维和杂质之类,然后取上清再加入氯仿,可以帮助提高氯仿的效率。然后就是在加入 Trizol 后,可以将裂解液放到-80 冻存半小时以上,据说冻融过程中可以再次帮助更加充分的裂解细胞,分离蛋白和 RNA。我试了一下,的确有效果。 7. 关于个步骤的时间: 标准的时间是: a. 液氮研磨(没时间要求,只要组织不化就好, 我一般一个组织十分钟左右,女孩子可能时间长一些,毕竟体力活) b. 加入 Trizol 裂解 5-10 分钟(我觉得还是 10 分钟比较
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