氨甲酰化地氯雷他定

三氯乙酸-丙酮法提取植物全蛋白

稍微加热溶解。但切记加热温度不可超过 30°C，否则尿素会裂解产生异硫氰酸从而导致蛋白质的氨甲酰化。 ( 3 ) SB 3-10 在尿素中很难溶解（这也是为什么尿素浓度限制在 5 mol/L 的原因），因此在解冻 R2D2 溶液时需要较长时间，必须待溶液完全澄清后方可使用。 ( 4 ) 要想获得较高的蛋白质提取效率，必须将植物组织预先研磨成非常细小的粉末 。对于某些坚硬的植物组织（ 如玉米粒），在研磨前必须先将其破碎。也可以用加有金属小球（6 mm 直径

【资源】双向电泳之第一向等电聚焦(IEF)==非常详细

胶条的水化和电泳 仪器： IPGphor 试剂： 水化液（8M 尿素，2%CHAPS，15mM DTT 和0 .5%IPG 缓冲液）： 水化液需当天新鲜配制(可配成储液分装-20 度保存，但不可反复冻融)。 尿素溶液加热温度不能超过37°C， 否则蛋白会发生氨甲酰化。 实验步骤： 一. 加样品水化 1. 用样品溶解缓冲液(9M 尿素， 4%CHAPS ， 2%IPG 缓冲液，40mM DTT,40mM Tris-base)溶解样品 。蛋白质上样浓度不要超过10

双向电泳各步骤注意事项

1. 总的策略 ① 化学试剂纯度要高，至少是分析级，目前国产试剂达不到纯度要求 ② 使用去离子水(电导 ③ 尿素和丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺需新鲜配制 ④ Deionize urea prior to use ⑤ 包含尿素的溶液加热温度不超过 37℃，否则会发生蛋白质氨甲酰化 nbsp;过滤所有的溶液，使用干净无灰尘的容器 2. 样品制备 ① 样品提取缓冲液(裂解缓冲液)必须新鲜配制。或者分装