T/G HAVSMC供应商

培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.

资源名称    T/G HAVSMC供应商
种属  人主动脉血管平滑肌细胞
提供形式  P4-5代T25细胞培养瓶
培养方法
培养基  90%DMEM+10%FBS
生长条件  95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度
生长特性  贴壁生长
存储条件  50%DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
详细说明
细胞培养的优点：
1.T/G HAVSMC供应商研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

收到T/G HAVSMC供应商如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
人载脂蛋白A4(ApoA4)酶联免疫吸附测定试剂盒 10g
59122-55-3高端化学试接触蛋白6(CNTN6)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
苷 5‘-（α,β-亚）二，钠 质量国进口 Adenosine 5'-(α,β-methylene)diphosphate, sodium salt 植物杆 Lactobacillus plantarum
人载脂蛋白B(ApoB)酶联免疫吸附测定试剂盒 5g
59122-55-3高端化学试接触蛋白5(CNTN5)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
当药苷(标准品) 质量HPLC≥98%,标准品 Swertianolin 柄金钱(金针菇) Flammulina velutipes球 Pediococcus acidilactici
人载脂蛋白C1(ApoC1)酶联免疫吸附测定试剂盒 100mg
69227-93-6高端化学试封闭蛋白19(CLDN19)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
巨大戟-5,20-缩-3-当归酯  HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 ELISA Kit for Human Thiomorpholine-carboxylate dehydrogenase小鼠花生四(AA)ELISA试盒，AA ELISA Kit
T/G HAVSMC供应商英文名称对照品人不耐热肠B亚单位(LTB)ELISA Kit，48T/96T 1.2ml×3ampules
Claudin 20英文名称：phospho-BACH1 (Ser990)人血栓B2(TXB2)免疫试盒
C17orf42英文名称：ARA9山羊白介素8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒
英文名称对照品人流行性出血热病体IgM (EHF)ELISA Kit，48T/96T 1.2ml×3ampules
CEP135英文名称：phospho-BAD (Ser99)人血栓A2合成酶(TX-A2)免疫试盒 英文名称3,4-二啡酰奎宁小鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA Kit，48T/96T 25mg
C17orf97英文名称：ARF5山羊白介素6(IL-6)免疫试剂盒
英文名称对照品人麦胶蛋白/麦溶蛋白体(AGA)ELISA Kit，48T/96T 1.2ml×3ampules
英文名称4,5-二啡酰奎宁大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA Kit，48T/96T 25mg
CECR1英文名称：ARFBP1山羊白介素4(IL-4)免疫试剂盒
公司优势：
1.具有多年的销售经验和资深的行业背景，我司秉承质量优先的理念，重视自主创新，希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系；
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