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上海谷研
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产品名称:大鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒
有效期 2年
储存条件 RT,避光,有效期2年
外观(性状) 液体
单位 盒
本分离液为Ficoll、羟乙基淀粉550与泛影酸葡甲的混合液。抗凝外周血可在分离液中分层。离心时,在Ficoll、羟乙基淀粉的作用下红细胞与粒细胞聚集并迅速沉降;此时,淋巴细胞及其他单个核细胞仍处于分离液上层,红细胞污染可忽略不计。大部分血小板可在细胞清洗低速离心过程中去除。 其他人及动物多种比重细胞分离液,因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞带电不同,用户在制定分离液时应提供所需分离液的比重、动物种属及被分离细胞的名称。
适用于从动物抗凝血液中分离淋巴细胞,无菌条件下所分离的淋巴细胞可用于细胞培养等。本品仅供科研使用。
密度:1.0830±0.0001g/ml
本品易感染细菌,需无菌条件操作。无菌条件下操作,启封后置常温保存。如 4℃保存,本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。
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文献和实验Ficoll (2)取抗凝外周血(全血)与无菌 PBS 按照 1:1 充分混匀,用移液管沿管壁缓慢叠加于分层液面上,动作一定要轻,注意保持清楚的界面。外周血,PBS,淋巴细胞分离液最终体积比为 1:1:1。 (3)水平离心 400 g 成×30 分钟(可根据淋巴细胞分离液 Ficoll 或离心机转子要求调整) (4)离心后可看见管内分为三层,上层为血浆和 PBS,下层主要为红细胞和粒细胞,中层为淋巴细胞分离液。在上、中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带,主要就是单个核细胞,包括淋巴细胞与单核
度的功能细胞。二、人外周血中 CD4 T 细胞分选实例1.产品信息: MojoSort™ Human CD4 T Cell Isolation Kit(BioLegend, Cat#480009),阴性分选试剂盒2.检测仪器型号:BD LSRⅡ3.样本:正常人外周血4.分选前后检测相关产品:PE-CD4(Biolegend, Cat# 317410)5.实验过程(1)采血之后采用达优™ 人淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞。分离之后能见到明显的白膜层。(达优,Cat#DKW-KLSH-0100
,最后取 5μL 2000 倍稀释样本到 245μL 标准品&样本稀释液内,做 50 倍稀释,总共稀释 100000 倍; 每步稀释时,取液量不少于 3μL,稀释倍数不超过 100 倍。每步稀释都需混合均匀。 Q3:大小鼠采血容量? A3:根据实验方案所需采血量的要求,我们可以选择不同的采血方式。 鼠尾采血法: 取血量较少时,采用此方法。通常选择剪断尾巴进行采血。亦可不剪尾,用 7-8 号注射针头刺入尾静脉采血。 小鼠每次可取血 0.1mL,大鼠每次可取血 0.2~0.4mL,可多次反复采血
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