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2年
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科邦兴业(北京)科技有限公司
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室温保存
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50次

55114 QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit 游离核酸提取试剂盒
For 50 preps: QIAamp Mini Columns, Tube Extenders (20 ml), QIAGEN Proteinase K, Carrier RNA, Buffers, VacConnectors, and Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml)
QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit大大简化了从血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA的过程。
Features
- 浓缩的核酸,高上样量,低洗脱体积
- 高效回收DNA和RNA碎片
- 无需有机提取或乙醇沉淀
- 完全去除污染物和抑制剂
Performance
分析血液中肿瘤特异性的胞外DNA片段和mRNA可对普通血液样品进行特异性地肿瘤类型检测。这些存在于血清或血浆中的游离核酸通常都是<1000 bp(DNA)或<1000 nt(RNA)的片段。此外,小至21 nt的miRNAs可作为某些癌症和疾病状态的生物标记。
QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit可从人类血浆、血清和其他无细胞体液中高效纯化游离核酸。纯化效率高、重现性好、产量高(参见" Reproducible recovery of circulating DNA")。应用延长的上样管和真空装置QIAvac 24 Plus可将样品处理量提至5 ml,洗脱体积可在20–150 μl之间灵活变化,可浓缩低浓度核酸。 该试剂盒采用先进的技术,硅胶膜选择性的结合目标核酸,提高片段化核酸的回收率(参见" Improved recovery of fragmented DNA")。
使用RNase-Free DNase Set进行DNA柱上消化,纯化获得不含DNA的游离RNA 。特别设计的流程确保高效纯化诸如miRNA等小RNA(参见" Efficient purification of circulating miRNA")。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit高效纯化甲基化DNA,经纯化的DNA维持其甲基化状态,可进行亚硫酸氢盐转化实验,进行甲基化状态分析(参见" Efficient recovery of methylated DNA")。
经纯化和浓缩的游离DNA和RNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可即用于各种下游应用,包括:
- PCR 和定量real-time PCR以及RT-PCR
- 用于基于血液样品的癌症生物标记的研究、验证和检测
- 病毒核酸检测
Principle
QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit简化了从血浆或血清中纯化游离DNA和RNA的过程。无需苯酚-氯仿抽提。核酸特异性结合到QIAamp Mini离心柱上,污染物流走。PCR抑制物,如:二价阳离子和蛋白,可通过三步有效的洗涤步骤被完全去除,结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid技术从人类血浆、血清或尿液中获得游离的DNA和RNA。
QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit有可选择性结合的硅胶膜和20–150 μl灵活的洗脱体积。使用RNase-Free DNase Set进行DNA柱上消化,可纯化游离RNA。
Procedure
QIAamp Circulating Nucleic Acid的流程包括4步(裂解、结合、洗涤和洗脱),使用QIAamp Mini离心柱在真空装置上处理。简单的操作适用于同时处理多个样品,可在2小时内处理24个样品。QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit有待使用者验证是否能适用于所有的病毒种类的RNA和DNA纯化。
Applications
QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit可从含低浓度DNA和RNA碎片的原始样本(人血浆中常规游离DNA的浓度为1–100 ng/ml)中纯化和浓缩游离的DNA、RNA、miRNA,包括病毒核酸。起始样本体积至多5 ml。
QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit可从以下样本类型中纯化和浓缩核酸:
- 人类血浆
- 血清
- 尿液
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文献和实验文献速递:全面液体分析循环肿瘤DNA和蛋白质生物标志物为评估预后带来新的可能
,并且可以与其他策略相结合,提供更好的评估。 其中,为了验证ctDNA动态与HCC进展中的肿瘤负荷相关性,该研究团队提取并分析了患者在临床过程中收集的连续血浆样本中的ctDNA。采用了QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit+ QIAseq cfDNA All-in-One Kit进行血浆游离DNA提取与文库构建,并结合全基因组测序与靶向测序技术来获得突变等位基因频率的相关性(图A)。 图A. HCC进展过程中血浆样本中体细胞SNVs和CNVs的动态变化。在患者H1607的临床
of containing most of the necessary reagents pre-packaged in RNase-free quality (e.g. polyATtract from Promega or Oligotex mRNA kit from Qiagen work well for Neurospora, Table 1)。 Depending on the kit size, this allows isolation of poly(A)-RNA from 0.25 to 5 mg
Potassium acetate,0.67M acetic acid 3、 Wash buffer:80mM potassium acetate,10mM Tris-Cl,pH7.5,40uM EDTA,60% ethanol 4、 1.6% Agarose gel 5、 Miniprep column (QIAprep Spin Miniprep Kit, QIAGEN) 6、 ethidium bromide (10 μl/100ml) 我们实验室是这样做的,如果药物或者处理
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