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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
A DNA sequence encoding the mouse HAVCR2 (AAL65156.1) (Met1-Arg191) was expressed with the Fc region of human IgG1 at the C-terminus.
- 亚型:
见说明书
- 形态:
液体
- 保存条件:
4℃
- 克隆性:
无
- 标记物:
见说明书
- 适应物种:
Mouse
- 保质期:
12个月
- 抗原来源:
见说明书
- 目录编号:
51152-M02HL
- 级别:
免疫学
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 宿主:
HEK293 Cells
- 应用范围:
WB
- 浓度:
见说明书
- 靶点:
HAVCR2
- 抗体英文名:
Mouse TIM3 / HAVCR2 HEK293 Cell Lysate (WB positive control)
- 抗体名:
Mouse TIM3 / HAVCR2 HEK293 Cell Lysate (WB positive control)
- 规格:
300 µg
反应种属:Mouse
裂解液靶点:HAVCR2
裂解液应用:WB
裂解液保存条件:Store at 4℃. After re-dissolution, aliquot and store at -80℃.
裂解液产品描述:Human Cell lysate that Mouse TIM3 / HAVCR2 transfected / overexpressed for Western blot (WB) positive control. The whole cell lysate is provided in 1X Sample Buffer (1X modified RIPA buffer+1X SDS loading buffer).
裂解液表达宿主:HEK293 Cells
裂解液制备方法:Cell lysate was prepared by homogenization of the over-expressed cells in ice-cold modified RIPA Lysis Buffer with cocktail of protease inhibitors (Sigma). Cell debris was removed by centrifugation. Protein concentration was determined by Bradford assay (Bio-Rad protein assay, Microplate Standard assay). The cell lysate was boiled for 5 min in 1 x SDS loading buffer (50 mM Tris-HCl pH 6.8, 12.5% glycerol, 1% sodium dodecylsulfate, 0.01% bromophenol blue) containing 5% b-mercaptoethanol, and lyophilized.
裂解液Buffer:Modified RIPA Lysis Buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl, 1mM EDTA, 1% Triton X-100, 0.1% SDS, 1% Sodium deoxycholate, 1mM PMSF.
裂解液质控信息:12.5% SDS-PAGE Stained with Coomassie Blue after protein purification.
裂解液使用建议:1. Centrifuge the tube for a few seconds and ensure the pellet at the bottom of the tube. 2. Re-dissolve the pellet using 200μL pure water and boil for 2-5 min.
裂解液稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt.
裂解液使用说明:Western blot (WB): Use at an assay dependent dilution. Other Applications: Not tested. Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
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文献和实验-bin/carddisp.pl?gene=HAVCR2&keywords=CD366 TIM3作为重要的细胞免疫负调控因子,高表达于辅助型T细胞(Thl细胞)和细胞毒性T细胞中(Tcl细胞),并产生抑制信号从而导致Thl细胞和Tcl细胞的凋亡。其配体为半乳凝素9(Gal-9),这是一种被广泛表达的可溶性分子[7],与TIM3分子的免疫球蛋白可变区上的寡聚糖结合,从而对Thl驱动的免疫反应产生负调控作用。当TIM3与其配体半乳凝素9(Gal-9)结合后,促进Thl细胞凋亡[8] 。也就是说
用去离子水洗涤加样槽以除去未聚合的丙烯酰胺。把凝胶固定于电泳装置上,上下槽各加入Tris甘氨酸电泳缓冲液。 3.SDS-PAGE电泳 ① 将抗原(细胞裂解液、重组蛋白)样品置于凝胶加样缓冲液中,在100℃加热三分钟以使蛋白质变性。 ② 设计加样顺序,作好实验记录,按预定顺序加样。一般每个电泳道加样最大体积为25µl,每个电泳道上样的最低蛋白质量(每一条蛋白质条带):0.1µg(考马斯亮蓝染色)-2ng(银染色),最高蛋白质量(蛋白质混合物):20-40µg。
或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
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