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Sino Biological MERS-CoV NP昆虫细胞裂解液 WB阳性对照 昆虫细胞裂解液

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  • ¥1560
  • Sino Biological已认证
  • 北京
  • 40068-V08BL
  • 2025年08月12日
  • WB
  • Baculovirus-Insect cells
  • MERS-CoV
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    • 详细信息
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    • 技术资料
    • 免疫原

      A DNA sequence encoding the Nucleoprotein (Human betacoronavirus 2c EMC/2012) (AFS88943.1) (Met 1-Asp413) was fused with a polyhistidine tag at the C-terminus.

    • 亚型

      见说明书

    • 形态

      液体

    • 保存条件

      4℃

    • 克隆性

    • 标记物

      见说明书

    • 适应物种

      MERS-CoV

    • 保质期

      12个月

    • 抗原来源

      见说明书

    • 目录编号

      40068-V08BL

    • 级别

      免疫学

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京义翘神州科技股份有限公司

    • 宿主

      Baculovirus-Insect cells

    • 应用范围

      WB

    • 浓度

      见说明书

    • 靶点

      NP-CoV

    • 抗体英文名

      MERS-CoV (NCoV / Novel coronavirus) Nucleoprotein / NP Insect Cell Lysate (WB positive control)

    • 抗体名

      MERS-CoV (NCoV / Novel coronavirus) Nucleoprotein / NP Insect Cell Lysate (WB positive control)

    • 规格

      300 µg

    MERS-CoV (NCoV / Novel coronavirus) Nucleoprotein / NP Insect Cell Lysate (WB positive control)(产品说明)
    反应种属:MERS-CoV
    裂解液靶点:NP-CoV
    裂解液应用:WB
    裂解液保存条件:Store at 4℃. After re-dissolution, aliquot and store at -80℃.
    裂解液产品描述:Baculovirus-Insect Cell lysate that Novel coronavirus (HCoV-EMC/2012) Nucleoprotein / NP transfected / overexpressed for Western blot (WB) positive control. The whole cell lysate is provided in 1X Sample Buffer (1X modified RIPA buffer+1X SDS loading buffer).
    裂解液表达宿主:Baculovirus-Insect cells
    裂解液制备方法:Cell lysate was prepared by homogenization of the over-expressed cells in ice-cold modified RIPA Lysis Buffer with cocktail of protease inhibitors (Sigma). Cell debris was removed by centrifugation. Protein concentration was determined by Bradford assay (Bio-Rad protein assay, Microplate Standard assay). The cell lysate was boiled for 5 min in 1 x SDS loading buffer (50 mM Tris-HCl pH 6.8, 12.5% glycerol, 1% sodium dodecylsulfate, 0.01% bromophenol blue) containing 5% b-mercaptoethanol, and lyophilized.
    裂解液Buffer:Modified RIPA Lysis Buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl, 1mM EDTA, 1% Triton X-100, 0.1% SDS, 1% Sodium deoxycholate, 1mM PMSF.
    裂解液质控信息:12.5% SDS-PAGE Stained with Coomassie Blue after protein purification.
    裂解液使用建议:1.  Centrifuge the tube for a few seconds and ensure the pellet at the bottom of the tube. 2.  Re-dissolve the pellet using 200μL pure water and boil for 2-5 min.
    裂解液稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt.
    裂解液使用说明:Western blot (WB): Use at an assay dependent dilution. Other Applications: Not tested. Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

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    • WB实战指南(一) 之样品制备

      是0.5% NP-40,用于破坏核膜结构;可用到1%,但此时染色体会析出,沉淀粘稠。3、组织块裂解:组织块较大用匀浆的方法最合适,现在有不少转头很小的匀浆器。当组织超微量的时候,比如50mg新鲜癌组织,我采用的方法是(1). 低温(剪)搅碎,成肉糜状。(2). 锡箔纸包裹好,放入少量液氮,快速敲击(控制力量,尽量避免弄破锡箔纸),进一步破碎;反复多次。(3). 用上述细胞裂解液回收。4、分泌型蛋白富集:用无血清培养基培养细胞,收集上清液用于WB检测;如果含量过低,需要用TCA沉淀富集。理论上,从普通培养基中

    • WB实战指南(二) 之 蛋白质电泳

      几倍,而WB灵敏度是以10的几次幂量级的,所有目的蛋白信号的唯一方案就是IP富集(可特异提高目的蛋白浓度数百数千倍,并去除其它杂蛋白干扰)。增加上样量的另一个坏处是,本来高表达的蛋白,诸如内参,在同样WB条件下,可能出现荧光灼烧式粹灭(一晃而灭)或者条带中空。仍以6孔板80%以上汇合度为例,细胞裂解液和SDSLB通常都是投入200ul(最少80ul,这样面积的培养板如果裂解液投入太少,回收时的损失就太大,上样就很难做到一致),而这种浓度条件下制备的样品,电泳时上样量要控制在5-6ul,最少

    • WB实战指南+正确使用Quantity One定量

      状态,保证裂解细胞的方式较为温和,便于随后的IP等试验。其他Na盐浓度的细胞裂解液也很常见,诸如0.15M(生理盐浓度)、0.3M、0.6M(高盐系列,裂解细胞时染色体会析出,细胞碎片和沉淀非常粘稠)及0.8-1.2M;0.3M及以下适合IP试验,0.6M及以上适合纯化蛋白,尤其相互作用较强的复合体,要得到纯化的一些复合体的组成蛋白一般采用极端的高盐裂解细胞。 用于核蛋白的裂解的原因是0.5% NP-40,用于破坏核膜结构;可用到1%,但此时染色体会析出,沉淀粘稠。 组织

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