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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
A DNA sequence encoding the C-terminal segment of human PARP3 isoform 1 (Q9Y6F1-1) (Met 1-Leu 533) was fused with the N-terminal polyhistidine-tagged GST tag at the N-terminus.
- 亚型:
见说明书
- 形态:
液体
- 保存条件:
4℃
- 克隆性:
无
- 标记物:
见说明书
- 适应物种:
Human
- 保质期:
12个月
- 抗原来源:
见说明书
- 目录编号:
11190-H20BL
- 级别:
免疫学
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 宿主:
Baculovirus-Insect cells
- 应用范围:
WB
- 浓度:
见说明书
- 靶点:
PARP3
- 抗体英文名:
Human PARP-3 / PARP3 Insect Cell Lysate (WB positive control)
- 抗体名:
Human PARP-3 / PARP3 Insect Cell Lysate (WB positive control)
- 规格:
300 µg
反应种属:Human
裂解液靶点:PARP3
裂解液应用:WB
裂解液保存条件:Store at 4℃. After re-dissolution, aliquot and store at -80℃.
裂解液产品描述:Baculovirus-Insect Cell lysate that Human PARP-3 / PARP3 transfected / overexpressed for Western blot (WB) positive control. The whole cell lysate is provided in 1X Sample Buffer (1X modified RIPA buffer+1X SDS loading buffer).
裂解液表达宿主:Baculovirus-Insect cells
裂解液制备方法:Cell lysate was prepared by homogenization of the over-expressed cells in ice-cold modified RIPA Lysis Buffer with cocktail of protease inhibitors (Sigma). Cell debris was removed by centrifugation. Protein concentration was determined by Bradford assay (Bio-Rad protein assay, Microplate Standard assay). The cell lysate was boiled for 5 min in 1 x SDS loading buffer (50 mM Tris-HCl pH 6.8, 12.5% glycerol, 1% sodium dodecylsulfate, 0.01% bromophenol blue) containing 5% b-mercaptoethanol, and lyophilized.
裂解液Buffer:Modified RIPA Lysis Buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl, 1mM EDTA, 1% Triton X-100, 0.1% SDS, 1% Sodium deoxycholate, 1mM PMSF.
裂解液质控信息:12.5% SDS-PAGE Stained with Coomassie Blue after protein purification.
裂解液使用建议:1. Centrifuge the tube for a few seconds and ensure the pellet at the bottom of the tube. 2. Re-dissolve the pellet using 200μL pure water and boil for 2-5 min.
裂解液稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt.
裂解液使用说明:Western blot (WB): Use at an assay dependent dilution. Other Applications: Not tested. Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
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文献和实验通常需对不同样品抗原的总量进行比较或确定样品中是否存在待测抗原。在此过程中,细胞、组织或其他样品均直接用样品缓冲液破碎,当样品中的染色体DNA被剪切成短片段后,经适当处理即可用于特定的电泳系统。在本例中,样品是以适合于标准的Tris/GlycineSDS-PAGE方式制备的。某些样品需经剪切处理染色体DNA降低其溶液黏度,最简便的方法是超声处理,用浸入式探头或杯型超声器均可。1.对照免疫印迹从细胞裂解液开始就须设置两组对照。包括含有已知抗原的阳性对照样品和能与阴性对照抗体发生反应的细胞
(无)条带,如抗体无专一性则条带无变化举个例子,癌症免疫常用的 PD-L1 抗体,下图可看到 GTX104763 PD-L1 抗体,使用基因敲弱的细胞裂解液,WB 的条带会随之变弱,显示 GTX104763 抗体具有高特异性。GTX104763 还适合多种应用,包括 WB、ICC/IF、IHC-P(可达 1:1,000)、 IHC-Fr(可达 1:1,000),及多篇文献引用,为高敏、高特异性的可靠抗体工具。又如白血病标记物-CD44,CD44 参与介导细胞存活的迁移、增殖、分化和信号传导途径。GTX
是0.5% NP-40,用于破坏核膜结构;可用到1%,但此时染色体会析出,沉淀粘稠。3、组织块裂解:组织块较大用匀浆的方法最合适,现在有不少转头很小的匀浆器。当组织超微量的时候,比如50mg新鲜癌组织,我采用的方法是(1). 低温(剪)搅碎,成肉糜状。(2). 锡箔纸包裹好,放入少量液氮,快速敲击(控制力量,尽量避免弄破锡箔纸),进一步破碎;反复多次。(3). 用上述细胞裂解液回收。4、分泌型蛋白富集:用无血清培养基培养细胞,收集上清液用于WB检测;如果含量过低,需要用TCA沉淀富集。理论上,从普通培养基中
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