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天津本生生物
| KAPA建库试剂 | |||
| kapa | kk8504 | KAPA Hyper Prep (96rxn) | 96次 |
| kapa | kk2502 | KAPA HiFi HS+dNTPs (250U) | |
| kapa | kk2602 | KAPA HiFi HS RM (6.25ml) | |
罗氏与Kapa Biosystems公司合作升级NimbleGen现有的二代测序目标序列捕获方案,Kapa Biosystems公司将为罗氏NimbleGen定制二代测序建库试剂盒,搭配NimbleGen的各款序列捕获产品使用。该款试剂盒将由罗氏NimbleGen负责销售,目前已在国内上市。

图2:此次推出的建库试剂盒可以提高测序结果的均一度。图中横坐标显示了捕获目标区域上GC含量,纵坐标表示该GC含量的目标区段的测序深度。蓝色为此次推出试剂盒的实验结果,相比红色用其他方法进行实验的结果,可以看到此次推出的建库试剂在AT富集和GC 富集区域的测序深度都有提高。
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文献和实验由于全血中存在有很多PCR反应抑制物,例如,血红素,蛋白质,盐,抗凝剂等,使得常规的Taq聚合酶不能从全血中直接进行PCR反应。因此,现在临床上往往先要从全血中提取DNA, 但即使这样,也不能完全克服上述抑制物的影响,这也是为什么目前临床上的DNA扩增反应,常常失败的原因如果在遗传病诊断中,能够从全血中快速有效地进行DNA扩增,可以节省大量的人力,时间,费用,对临床遗传病鉴定,以及亲子鉴定是一个革命化的改进。KAPA全血直接PCR:是世界上首个专门为全血PCR改造的高效DNA多聚酶。通过直接
含有这两种酶切位点序列。 已经开始进行ta克隆 如楼上战友所述,TA克隆的确是长片段亚克隆的好的手段。我最初开始学习构建质粒的时候也是先上TA,不过我们实验室一直使用一种KAPA HIFI readymix的酶,效果很好,保真性也非常非常高,就是做TA的时候比较麻烦,需要把PCR产物纯化回收后再加一次A tail,而就是这一步我感觉一直没有摸索到最优化稳定的条件,所以每次加A后连pCR2.1 转化的结果都不稳定,有时候长的多有时候长得少,之前曾经就这个问题发帖
列的质量评估工作,证明了提取环境样品DNA的过程中使用IRT技术的重要性。一篇总结性文章曾发表于ASM 2010年年会(可致电:0755-8348 9872索取)。使用含IRT技术的MO BIO PowerSoil® DNA Isolation Kit,与不含IRT技术的竞争品牌试剂盒,提取0.1g堆肥做对比试验。最终DNA用分光光度法和凝胶电泳分析作初步分析,然后用通用引物16S rRNA,KAPA2G Fast HotStartReadymix酶跑end-point PCR。下图(图3A)展示
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