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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human ZNF548 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:ZNF548
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human zinc finger protein 548
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文献和实验。二、操作步骤(一)获得目的基因1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。(二)构建重组表达载体1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。2、PCR
。 Stratagene的XL10-Gold®几乎算得上是高效转化的代名词了,研究者一旦要克隆大质粒、连接DNA和建库,克隆甲基化DNA,进行蓝白斑筛选等,首选的就是XL10-Gold®和其衍生菌。XL10-Gold®用途包括:——克隆大DNA:包括表达质粒,基因组DNA克隆——构建质粒文库:减少DNA大小偏倚性,使全长cDNA克隆、双杂交质粒等各种大小的质粒转化效率更接近,提高文库代表性(比DH10B高25倍)。Hte 基因型 Hte(高效转化)基因型是Stratagene开发的特异性提高大质粒、连接DNA
糖链上无末端,3甘露醇,抗原性较低,特别适合于生产医药用重组蛋白质。 (3)裂殖酵母(Schizogenesis pombe)表达系统 裂殖酵母不同于其他酵母菌株,它具有许多与高等真核细胞相似的特性,它所表达的外源基因产物具有相应天然蛋白质的构象和活性。遗憾的是,目前对它的研究较少。 3、利用酵母菌表达外源基因的步骤 以巴斯德毕赤酵母表达外源基因为例,包括如下步骤:将目的基因克隆入毕赤酵母表达载体,收获阳性重组表达质粒一用适当的限制性内切酶消化阳性重组质粒,使之线性化一将线性化的阳性重组
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