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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human RPP25L Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:RPP25L
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human ribonuclease P/MRP 25kDa subunit-like
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文献和实验原理】 1.外源基因在原核细胞中的表达 蛋白质通常是研究的最终目标,因此蛋白质的表达在基因工程中占有非常重要的地位。常用的表达系统有原核细胞和真核细胞。原核细胞表达系统主要使用大肠杆菌,真核细胞表达系统主要有酵母细胞、哺乳动物细胞和昆虫细胞。这些表达系统各有优缺点,应根据实验目的和实验室条件加以选择。本实验主要介绍以大肠杆菌为代表的原核细胞表达系统。 (1)大肠杆菌表达系统的特点: 生物学特性和遗传背景清楚,易于操作
原核细胞 l 用 IPTG 诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因 含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建 1. PCR 修饰或限制性内切酶消化分离 DNA 片段,片段 5’ 端和 3’ 端带有与 IPTG 诱导表达载体对应的限制酶位点。 2. 含靶 cDNA/ 基因的 DNA 片段
活性的话,也可能出现高度降解的情况。如重组人基质金属蛋白酶3(MMP-3)被认为有促使哺乳动物上皮细胞凋亡的作用。它在Pp中高度降解,仅当与其组织抑制物TIMP-1共表达时才能保持稳定。这也提醒我们外源基因本身对产物稳定性的影响同样重要。 7、翻译后修饰 一般情况下Pp能产生较酿酒酵母明显要短的高甘露糖型寡糖链,且较均一,长度在8-14个之间,使产物更加稳定,而这正是Pp表达外源蛋白的一个优势。虽然糖基化对某些外源蛋白的活性没有太大影响,它却可能在蛋白折叠和抗蛋白酶降解中起重要作用。然而,糖
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