Sino Biological 人PAXBP1 cDNA表达质粒 稳定/瞬时表达 PAXBP1基因

RNA介导的基因沉默

1 : 在细菌中通过“空白”区域将自我互补的区域隔开，获得稳定的反向重复序列。如果间隔序列编码内含子，基因沉默效率会非常高，确保由目的基因构建的转化子可以 100% 地引起不同程度的基因沉默[12]。 注 2 : BSMV 是大麦病毒家族的典型成员，它是正义单链 RNA 病毒，由 α、β 和 γRNA 组成三元基因组。选择植物中需要被沉默的目的基因的转录序列片段插入到 DNA 质粒中，可以通过体外转录合成 γRNA。植物 cDNA片段被克隆到 γb 可读框终止子的下游（图 12.2)。 注

cDNA文库构建

概述 cDNA文库是以特定的组织或细胞mRNA为模板，逆转录形成的互补DNA（cDNA）与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌形成重组DNA克隆群，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库。cDNA文库特异地反映某种组织或细胞中，在特定发育阶段表达的蛋白质的编码基因，因此cDNA文库具有组织或细胞特异性。 cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说，从基因

基因芯片技术知识概要

芯片。而基因芯片中，最成功的是DNA芯片，即将无数预先设计好的寡核苷酸或cDNA在芯片上做成点阵，与样品中同源核酸分子杂交的芯片。基因芯片的基本原理同芯片技术中杂交测序（sequencing by hybridization，SBH）。即任何线状的单链DNA或RNA序列均可被分解为一个序列固定、错落而重叠的寡核苷酸，又称亚序列（subsequence）。例如可把寡核苷酸序列TTAGCTCATATG分解成5个8nt亚序列：　　(1)　CTCATATG　　(2)　GCTCATAT　　(3)　AGCTCATA