Sino Biological Human TADA2B表达质粒 哺乳动物稳定瞬时表达 人源表达质粒

CELL | 线粒体 DNA 编辑技术最新进展

室在 Cell 杂志发表研究论文 Targeted A-to-G base editing in human mitochondrial DNA with programmable deaminases [2]。该论文以刘如谦团队开发的线粒体基因组精准编辑工具 DdCBE 为基础，进一步结合腺嘌呤脱氨酶 TadA 的研究成果，开发出了可对线粒体基因组进行 A-G 精准编辑的新工具 TALEDs（transcription activator-like effector-linked deaminases

表达EGFP的质粒和目的基因共转染并流式检测

在基因功能研究过程中，常常使用的一种方法就是将目的基因转到靶细胞内进行瞬时表达（transient expression），以流式细胞仪检测细胞周期的变化，观察转基因对细胞增殖的影响。由于各种转基因方法的不同，转基因的效率也不同，往往是仅有一部分细胞可以表达目的基因，没有转基因的细胞将影响检测的结果。如何将已经转基因的细胞同未转基因的细胞区分开来进行检测，是一个技术上的难点。常用的一种方法就是将表达绿色荧光蛋白的质粒和目的基因共转染；在共转染时，加入目的基因表达质粒的量远高于表达GFP质粒

【资源】各种原核和真核表达载体（总有一款适合你！）

一，酵母表达系统毕赤酵母表达系统（invitrogen公司）：分泌型质粒pPIC9K，宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha （甲醇诱导）宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二，原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签（N端）：PET5-(a)氨苄抗性带His标签（N端）：PET28-(a)卡那抗性带His标签（C端）：PET24-(b)卡那抗性带His标签（C端）：PET21-(a)氨苄抗性带His标签（N端）+TrxA(硫氧还蛋白)：PET-32