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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human respiratory syncytial virus (RSV) glycoprotein G / RSV-G Gene ORF cDNA clone expression plasmid, N-OFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:RSV-G
反应种属:RSV
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human RSV (subtype A, strain A2) glycoprotein G / RSV-G with N terminal OFPSpark tag.
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文献和实验长短,ABgene的酶是15min,ABI的是10min。通常情况都是两步法,95度15s,60度1min,然后加融解曲线。7900做出来的融解曲线峰比Primer 5的温度大约低2-3度。 标准曲线的问题。我现在用以前做完的PCR产物来做标准曲线,结果还是很不错的,斜率一般在-3.2-3.4之间,拟合度一般都在0.99以上。 会有人说用cDNA或者质粒做标准曲线会更好,曾经有人过来我们这里做,更希望说要把每个基因都设一条标准曲线,其实这个是完全没有必要的。理想的PCR反应扩增效率都是接近于1的,而标准
。整个实验操作流程提供长期稳定及规模可调的蛋白生产。与稳定基因表达相比,瞬时表达(TGE)主要适用于短期内制备重组蛋白,普健生物的瞬时表达使用悬浮细胞,能够完成mL到100L的体积的蛋白表达,一般在10天内即可快速转染,无需质粒DNA的遗传性选择。 08转染效率监测 基因的瞬时表达在24-72小时内就结束了。这种快速的瞬时表达非常适用于验证质粒表达和监测转染步骤的效率。 可以使用报告基因来确定优化条件,其表达蛋白易检测,在目的细胞中不含此蛋白或水平很低。常用的报告基因包括氯霉素乙酰转移酶(CAT
、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。当neo基因被整合进真核细胞DNA后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA ,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。 G418使用方法 室温下运输, 干粉在室温下储存,溶于水、甲醇,溶液于-20℃储存 由于各真核细胞系对G418敏感度不同,各新细胞系或株稳定转染 时杀死非
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