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BD Falcon
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需确认
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多种型号
致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌:
Roche试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
GE试剂,耗材,部分常用现货,周二,周五定货,3周左右。
SIGMA试剂,周一,五定货,3周左右到货。
THERMO试剂,部分现货,周三定货,2-3周到货。
ABCAM试剂,国内现货三天左右,期货四周左右。
Peprotech试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
罗氏原料,请来电来邮咨询。
OXOID,BD培养基础货期八周左右,部分现货。
MCE激动剂,ACROS、ALFA、阿拉丁等生化试剂现货定购。
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文献和实验液加 10 μ PMSF(100 mM),摇匀置于冰上。(PMSF 要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合。) 4.每瓶细胞加 400 μ 含 PMSF 的裂解液,于冰上裂解 30 min,为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动。 5.裂解完后,用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧(动作要快),然后用枪将细胞碎片和裂解液移至 1.5 ml 离心管中。(整个操作尽量在冰上进行。) 6.于 4℃ 下 12000rpm 离心 5 min。(提前开离心机预冷) 7.将离心后的上清
震动混匀数次);5、30分钟后收集第一管细胞:细胞悬液经70μm细胞滤网过滤,用1500-2000转离心6分钟,上清为Ⅰ型胶原酶加入未过滤网的组织,继续用于消化;6、离心管底细胞用α-MEM离心洗涤2次,每次用α-MEM重悬浮后用1500-2000转,离心6分钟,最后一次用记数板观察到有细胞。细胞最终悬浮于含有10%胎牛血清的α-MEM中,接种到培养瓶中培养。7、60钟后收集第二管细胞:细胞悬液经70μm细胞滤网过滤,用1500-2000转离心6分钟;用α-MEM洗2次,每次用α-MEM重悬浮后用
家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
Material and method:Material :1、培养皿、培养瓶、烧瓶、试管等。2、分离组织需要的眼科剪子、眼科镊子。3、5%CO2孵箱、PH计、95%氧气源。4、36电动恒温水浴。5、培养液、各种缓冲液及添加剂DMEM高糖培养基、Hank’s缓冲液 、20%胎牛血清,转换生长因子(TGF-β1)(5ng/mL)、胰岛素-转铁蛋白-硒(10ug/mL胰岛素,5ug/mL转铁蛋白,和0.5ng/mL亚硒酸盐)青霉素100U/Ml,链霉素100U/ml 。6、消化液 胶原
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