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上海羽朵生物
型号、规格:25人份/盒
主要组成成分:2×连接缓冲液,耐热DNA连接酶,探针混合液3001,连接反应终止液,2×PCR缓冲液A,Taq DNA聚合酶,多重荧光扩增引物组1A2,N9002对照DNA,空白对照。
适用范围:该产品用于对流产绒毛组织中人基因组DNA进行体外定性检测13三体,16三体,18三体,21三体,22三体和X单体共6种染色体非整倍体情况。
产品储存条件及有效期:-20 ℃ ± 3 ℃避光保存,有效期10个月。
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文献和实验Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
方程: 从线性方程上看,斜率(slope)为 -1/lg(1+E),所以 E = 10-1/slope-1。如果从标准曲线上得到斜率(-3.3),就可以算出扩增效率(0.99)。一般来讲PCR扩增效率在 90%-110% 都是可以用于数据分析的。效率低于 100%,是由于 PCR 反应中存在抑制因素;而高于 100% 可能一些污染、非特异性扩增或者是引物二聚体造成。 3. Real-time qPCR 的种类 根据 real-time qPCR 的化学发光原理可以分为2大类:一类为探针类,包括
中基因的拷贝数和浓度;后者可以对不同方式处理的两个样本中的基因表达水平进行比较。除此之外我们还可以对 PCR 产物或样品进行定性分析:例如利用熔解曲线分析识别扩增产物和引物二聚体,以区分非特异扩增;利用特异性探针进行基因型分析及 SNP 检测等。目前实时荧光 PCR 技术已经被广泛应用于基础科学研究、临床诊断、疾病研究及药物研发等领域。其中最主要的应用集中在以下几个方面: DNA 或 RNA 的绝对定量分析。包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测
设计测序引物的条件即可,对于插入缺失,同源区域等也有比较好的检测方案可以设计。缺点:价格比较高。LDR 连接酶检测反应法LDR 法是基于核酸特异杂交原理,设计两条 3' 端碱基不一样的鉴别引物用以鉴别 SNP 位点的两种 Allele,同时设计一条在位点另一侧的通用的引物,在高温连接酶的作用下,当左右两条寡核苷酸探针(鉴别引物以及通用引物)与目的 DNA 序列完全互补,并且两条探针之间没有空隙时才能发生连接反应,通过温控循环该特异性连接反应可反复进行,达到线性扩增的效果,最后通过荧光扫描片段
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