RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)

细胞凋亡 WB 没成功，你是不是用了 RIPA？

细胞凋亡是一种在基因控制下的细胞主动死亡过程，通常表现为核浓缩，起皱，膜发泡以及 DNA 片段化。WB 是研究细胞凋亡机理的基本方法之一，但是 WB 也不是谁都能做成功的，因为有可能你的第一步就做错了！用 WB 做细胞凋亡研究样品制备是第一步，样品制备方法至关重要否则会得到错误的结果和结论。样品制备，看你是不是这样做的：自配裂解液或者购买 RIPA，加上样品研磨啊研磨，孵育啊孵育，然后离心扔掉沉淀（RIPA 不可溶组分），取上清（RIPA 可溶组分）进行下游实验。对对对！都是这么做啊，扔

给大家提供一个改良RIPA的配方

在园子里讨论RIPA的很多，但仅仅只有最终物质的量浓度，要具体配制时还要换算成质量单位，十分不便。我在网上搜到了相应的改良RIPA的具体配法，希望能够有用。下面的内容将RIPA的基本配方、蛋白酶抑制剂配方以及磷酸酶抑制剂配方分开，对于有机会直接买蛋白酶抑制剂cocktail以及做磷酸化的战友而言十分方便。那样的话只需配制基本配方即可。 Preparation of Modifed Radioimmunoprecipitation (RIPA) Buffer RIPA Base

献给初学者：手把手教你做免疫共沉淀实验

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 注意：在准备做磷酸（酯）酶实验的时候，不加磷酸酯酶抑制剂。 一、工作液配制 配制 100 ml 的 modified RIPA buffe： 1.称取 790 mg 的 Tris-Base，加到 75 ml 去离子水中，加入 900 mg 的 NaCl，搅拌