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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
32
- 细胞类型:
原代细胞
- 物种来源:
人/大鼠/小鼠/其他
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/淋巴
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5ml-500ml
本公司生产的细胞总量约为5×10^5个/瓶,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。


三.注意事项
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月;
2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;
3.Primarker™人胃癌组织源成纤维细胞鉴定试剂盒只可用于科研。
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文献和实验的形态和生理特性。最后,与传统的2D细胞培养条件相比,这些水凝胶允许对细胞进行包封,以实现细胞在更贴近天然组织环境的3D环境中进行生长。 TRUEGEL3D™的功能和优点 TrueGel3D™适用于多种细胞系(MDCK、上皮细胞、成纤维细胞、癌细胞、原代细胞(包括淋巴细胞)、基质和胚胎心肌细胞)。 TrueGel3D™中形成水凝胶骨架的基本成分(葡聚糖、PVA、PEG)不会干扰细胞行为 凝胶透明,支持细胞成像分析 基于不同的凝胶速度,多种TrueGel3D™试剂盒可供选,可支持多种应用
经常用于亲和纯化的His-Tag,该His-Tag也可用于通过蛋白质印迹纯化后鉴定融合蛋白。以下是通过Ni-NTA旋转试剂盒(QIAGEN)在天然条件下纯化蛋白质的方法。蛋白质印迹分析融合蛋白的表达。在大肠杆菌 BL21菌株中表达TBO的融合蛋白,经NI-NTA旋转试剂盒纯化后,使用抗His标签抗体通过Western印迹分析蛋白质。Trx。Tag + TBO为22 KDa将来自5-ml培养体积的沉淀重悬于630μl裂解缓冲液(NPI-10)中,在冰上以30秒的间隔超声处理细胞悬浮液10秒短暂10
了其它功能(具体可见2008技术点评:流式细胞分选)。 近期BD还推出了首款干细胞分选试剂盒,这种即用型的多能干细胞鉴定和分选试剂盒包括了预滴定的荧光标记抗体,实验设定磁珠、验证过的实验步骤以及软件分析模板。此试剂盒针对现有的BD流式细胞仪优化过,开箱即用。即使经验不多的流式细胞仪用户,也能快速掌握这种方法。它同时将分析与分析之间的变异性减至最低,让结果更快更可靠。在抗体用完之后,能轻松补充抗体,满足特别的研究需求。 另外Beckman Coulter推出的适合筛选量大的实验
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