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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
一年
- 英文名:
//
- 库存:
大量
- 供应商:
北京普利莱
- CAS号:
//
- 规格:
100ml
饱和油红O染色液(Oil Red O Staining Solution) B1094
描述: 油红O (Oil Red ) CAS号1320-06-5,分子式C26H24N4O,分子量408.495。
油红O是一种亲脂染料,不溶于水,可溶于醇和油酯,根据其在溶剂中可以向脂质扩散的特点,可使脂滴呈红色。本品以适量的醇为溶剂,无需稀释、可直接使用。控制染色时间,可避免溶剂导致的脂滴溶解融合、形态破坏的问题,而且能降低背景染色。可用普通光学显微镜和荧光显微镜(激发波长540-580nm)观察。如果肝、肾、心等实质脏器发生脂肪变性,细胞内会出现多数中性脂肪滴。
适用范围: 本产品主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着、以及干细胞向脂肪细胞定向分化的研究。用于固定组织或细胞的脂肪染色。
组成:100ml
储存:室温避光保存,有效期12个月。
操作步骤:
样品处理:
1. 冷冻切片:
(1)4%多聚固定10分钟。(货号B1057)
(2)蒸馏水洗3次,每次3分钟。
2. 培养细胞:
(1)4%多聚固定10分钟。(货号B1057)
- 蒸馏水洗3次,每次3分钟。
饱和油红O染色:
- 染色液染色3分钟,后水洗。(货号C1411)
- 盐酸乙醇分化后,反蓝,水洗。(如不需复染细胞核,第1、2 步骤可省略)
- 蒸馏水冲洗干净的切片放入60%的异丙醇5分钟。
- 入饱和油红O染色液染色5分钟。
- 在异丙醇中稍洗,脱去肤色即可。
- 保持切片湿润,滴加甘油水溶液封片。(货号C1213)
温馨提示:
- 普通光镜观察:细胞质内脂滴呈红色;胞核呈蓝色。
- 荧光显微镜:在540-580nm波长下,发出红色荧光;也可采用Cy3 528-552nm的波长。可
说明:
- 在染色过程中,切片放入60%的异丙醇后,避免水洗。
- 请尽量缩短染色时间,以保持脂滴结构完整。
- 第一次使用时建议先取1-2个样品做预实验。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验油红 O属于偶氮染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类,它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置人染液时,染料则离开染液而溶于组织内的脂质(如脂滴)中,使组织内的脂滴呈橘红色。 一、油红O染液的配制 1.油红O 1g 异丙醇 100ml 2.油红O 足量 异丙醇 100ml 配成油红O饱和溶液,使用时以油红O饱和液一份加蒸馏水两份,过滤后使用。 二、染色程序 1.切片用甲醛―钙
小时后即可使用。 注:此液5天内失效,如此看来,浪费较大,建议配制70%酒精饱和液,或纯丙酮和70%酒精饱和液,它们使用方便,且不易失效。 结果:脂肪呈猩红色,比苏丹Ⅲ更为清晰。 三、油红染色法: 油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,并且优于苏丹Ⅳ。 试剂配制: 油红O 0.5g 异丙醇(含量98%) 100ml 此为油红饱和液,可长期保存备用。 染色步骤: (1)冻切片 (2)蒸馏水充分洗涤
原理: 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。 配制试剂:1. 苏丹红Ⅲ染色液:将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用; 2. 甲醛钙固定液:将10ml甲醛和1g CaCl2 混合加水至100ml; 3. 甘油明胶:将12g明胶
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