- ¥340 - 1440
- gelatins
- JLC-G017
- 国内
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
94
- 英文名：
TG1 Chemically Competent Cell
- 保质期：
12个月
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件：
避光保存
- 规格：
10×100ul/50×100ul
| 规格： | 10×100ul | 产品价格： | ¥340.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50×100ul | 产品价格： | ¥1440.0 |
TG1 Chemically Competent Cell
产品货号： JLC-G017
保存条件： -80℃
产品规格： 10×100μl 50×100μl
产品介绍：
基因型 :
[F´ traD36 proAB lacIqZΔM15]supE thi-1Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM ) 5(rK–mK–)
简单说明 :
TG1来源于E. coli K-12菌株，是目前生长速度快的克隆用大肠杆菌菌株，在平板上37℃，7h可见克隆。主要的噬菌体展示用菌株，同时也可用于普通质粒的构建，lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验；但不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。 High5TM系列TG1感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>1×109cfu/μg。
操作说明 :
1. TG1感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中），加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB无菌培养基，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项 :
1. 感受态细胞在冰上融化。冰上放置大约5分钟即可融化，融化后8分钟内加入质粒，否则会影响转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。
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文献和实验The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne
1从微量培养基平皿中挑取单个菌落，接种于5ml 2×YT培养基(17g蛋白胨，10g Bactoyeast,5g NaCl，加水至1 000ml)中，37℃振荡培养过夜。 2取上述过夜菌1∶100稀释接种入500ml新鲜的2×YT培养液中，37℃振荡培养至OD=05~07，约25~3h。 3将上述带有菌液的三角瓶置冰浴15~30min
一、材料与试剂 1. SOBor2xYT2. MES3. 足够80个管子的TFB（50 mL）/400转化DMSO4. 5 M NaCl 二、仪器 1. 离心机 三、步骤 1. 室温下在5 ml SOB或2×YT中接种菌并且培养过夜。2. 加过夜培养的菌到500 ml 的SOB或2×YT，其装在4L瓶中以最大限度的透气。加入36 ml 5 M 的NaCl，在30℃下培养。3. 大约3 h，OD600达到0.5。4. 离心细胞。取沉淀，吸取
