- ¥4200 - 5800
- 百奥莱博
- SYA773-VXD
- 北京
- 2025年07月14日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
177
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
及有效期：本试剂盒于-20℃
- 规格：
48次/盒
特别提示：包括禽传染性喉气管炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：禽传染性喉气管炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
产品货号：SYA773
产品规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对禽传染性喉气管炎病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用一步法荧光RT-PCR技术对禽传染性喉气管炎病毒RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断
二、用途：
该试剂盒适合于检测气管渗出物、支气管和肺组织、肾脏或输卵管等标本中禽传染性喉气管炎病毒(AILT)RNA，用于禽传染性喉气管炎病毒(AILT)感染的辅助诊断及流行病学调查，其检测结果仅供参考
三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
禽传染性喉气管炎荧光qRT-PCR反应液(AILT-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(AILT-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙èr胺四乙酸二钠)或柠檬酸钠抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(zuì好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议zuì后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(AILT-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(AILT-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的zuì高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(AILT-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明AILT核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明AILT核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行AILT qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明AILT核酸阳性；否则判为样本阴性。
九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管zuì好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
我公司销售的禽传染性喉气管炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验。 本科病毒分两个属：①哺乳动物腺病毒属：它们有共同的群特异性抗原，包括人腺病毒34个血清型和猿猴、牛、羊、猪、狗、鼠等哺乳类动物的腺病毒，其中狗的腺病毒具有明显的病原性，引起狗的传染性肝炎和喉气管炎；②禽腺病毒属：代表株是鸡胚致死孤儿病毒，它有14个血清型，具有共同的群特异性抗原。1976年，在荷兰从鸡中发现1种能凝集多种禽红细胞的腺病毒，定名为减蛋综合征病毒。 人腺病毒经呼吸道和粪口途径传播，按其血凝性分为4 个亚群：亚群Ⅰ中，特别是3、7型可引起急性呼吸道感染．3型引起
。因此，统一进场，统一清场，一个禽场只饲养一个品种、一个日龄的家禽是避免禽群发病的最有效措施之一。 四、优良品种的选育 １、无特定病原体（ＳＰＦ）的繁育：被指定的无特异病原体主要包括无鸡新城疫病毒，禽流感病毒、禽传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、禽脑脊髓炎病毒、马立克氏病病毒、传染性法氏囊病病毒、禽呼肠孤病毒，禽痘病毒、鸡白痢杆菌、禽多杀性巴氏杆菌、禽败血性霉形体等。因此，ＳＰＦ的繁育是防止常见传染病有效方式。 ２、抗病力强的品种选育：通过遗传杂交工程技术，选育抵抗力强的品种，或通过基因
标记探针技术 厦门大学分子诊断实验室 实时PCR基础： 实时PCR的提出、原理和应用 荧光PCR的各类探针与应用比较 荧光PCR体系的建立与优化：组分分析与添加剂 多重实时PCR体系建立 实时PCR定量检测的假病毒内标和外标 实时PCR基因分型及突变检测 实时PCR应用技术： 实时PCR在临床微生物检测中的应用（食源性致病菌、血液筛查等） 实时PCR在耐药突变检测中的应用（乙肝耐药、结核耐药、MRSA等） 实时PCR在临床遗传学中
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
