- ¥340 - 1440
- geltinsa
- JLC-G7199
- 国内
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
26
- 英文名：
EPI400 Chemically Competent Cell
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
10×100ul/50×100ul
| 规格： | 10×100ul | 产品价格： | ¥340.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50×100ul | 产品价格： | ¥1440.0 |
EPI400 Chemically Competent Cell
产品货号： JLC-G7199
保存条件： -80℃
产品规格 : 10×100μl 50×100μl
产品介绍 :
基因型 :
F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA tonA pcnB4 dhfr
简单说明 :
EPI400菌株来源于 EC100菌株，将 EC100 核基因中控制质粒拷贝数的 pcnB基因删除后引入一个诱导启动子驱动的 pcnB基因，即是EPI400 菌株。-
EPI400 菌株可以降低质粒的拷贝数，特别适合于各种不稳定 DNA 或毒性基因的克隆，在加入诱导剂Copy Cutter Induction Solution后又可以提高质粒产量到正常状态。
[mcrA, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]基因型使 EPI400 菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA。 recA1 和endA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。lacZΔM15 标记的存在使 DH10B可用于蓝白斑筛选，tonA 赋予其抗噬菌体T1和 T5的能力，rpsL赋予其链霉素抗性。
EPI400感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
操作说明 :
1. EPI400感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中），加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。。
注意事项 :
1. 感受态细胞在冰上融化。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。
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文献和实验一步实现单拷贝到高拷贝的转换－－Copy Control克隆技术（附图）
表达的条件下可以提供启动oriV所需要的trf A基因产物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供这个基因的产物。 二、CopyControl克隆和克隆诱导步骤（图2）： 图1 图2 将目标DNA片断连接到已经线性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。 转化感受态细胞（TransforMax EPI300
一步实现单拷贝到高拷贝的转换---CopyControl克隆技术
1 CopyControl 克隆 和 克隆 诱导步骤（图2）： 将目标DNA片断连接到已经线性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。 转化感受态细胞（TransforMax EPI300 E.coli），涂皿，在氯霉素LB培养基上筛选。在这种条件下，trfA基因的表达被抑制， 克隆 以单拷贝数量生长。 挑选 克隆
【共享】CopyControl克隆技术：一步法实现单拷贝到高拷贝
E.coli.这是一个工程菌株，含有受诱导启动子严谨控制的trf A基因，在诱导表达的条件下可以提供启动oriV所需要的trf A基因产物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供这个基因的产物。CopyControl克隆和克隆诱导步骤：将目标DNA片断连接到已经线性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。转化感受态细胞（TransforMax EPI300 E.coli），涂皿，在氯霉素LB培养基上筛选。在这种
