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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
222
- 英文名:
Hoechst 33342 Ready-to-use Stain Solution
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃避光
- 规格:
10mL|50mL
特别提示:包括即用型Hoechst33342染色液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:即用型Hoechst33342染色液
英文名称:Hoechst 33342 Ready-to-use Stain Solution
产品货号:KM0157
产品规格:10mL|50mL
本品为即用型的Hoechst 33342染色液,可直接用于固定细胞或组织的核染色,也可直接用于活细胞或组织的核染色。
Hoechst 33342是一种A:T特异性的DNA小沟配基,具有细胞膜渗透性,广泛用于细胞核DNA检测的荧光染料。与DNA结合后产生非常强烈的蓝色荧光,最大激发波长在350nm左右,最大发射波长在461nm左右。Hoechst 33342可通过流式细胞分选(FACS)进行基于DNA内容物的活细胞分选,可用来监测活细胞的染色质分布,用来检测BrdU插入细胞情况,通过荧光显微镜进行固定细胞观察,和研究凋亡早期和细胞周期分布情况。除了在荧光方面的功能,Hoechst 33342在细胞类型区分方面呈现多样化效应。可用来诱导细胞分化,可逆结合弗兰德红白血病细胞,抑制Topo I(拓扑异构酶I)活性,诱导HL-60细胞的凋亡,以及调控连接肌质网细胞的Ca2+外流并影响细胞分化。
保存:2-8℃避光保存,6个月有效。
使用方法:
固定的细胞或组织染色
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。Hoechst 33342染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行Hoechst 33342染色。
1.对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5min。
2.吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5min。
3.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=350/461nm。
活的细胞或组织染色
1.细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。对于六孔板,一个孔通常需加入1ml染色液;对于96孔板,一个孔通常需加入100μl染色液。
2.在37℃培养细胞10~20min。
3.用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
4.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=350/461nm。
注意事项:
1.Hoechst 33342对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2.荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3.为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液(Fluoromount-GTM,货号:KM0182)。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
我公司销售的即用型Hoechst33342染色液北京厂家,即用型Hoechst33342染液质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。B. 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0.5ml固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。C. 去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动数次。D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动数次。E. 用PBS
,包括:病人姓名、特定编码(或住院病人的病区、床号)、标本收集时间。标签应贴在容器上,不可贴在盖上。 2.4 标本的接收:实验室应建立严格的标本接收制度,工作人员在接收标本时,必须检查标本容器是否符合要求;标记内容与医生所填写化验单是否一致;从留尿到接收标本的时间是否过长;标本是否被污染。尿标本量不少于10ml,在特殊病例不可能达到此要求时(如小儿、烧伤、肾衰无尿期等),应在检验报告单上注明收到的尿量及检查方法(离心或未离心)。 3. 试剂 3.1 染色液名称:阿一中染色液(生产厂家:北京国联
1.烤片 烤片的目的是将带有蜡的组织切片牢固地黏在载玻片上,以免染色过程中切片脱落。切片在56~60℃的恒温箱中至少放置1小时才能达到此目的,但是,通常的烤片温度为;8~60℃,时间为2~6小时。由于高温干燥可加速组织中抗原的氧化,因此高温烤片对抗原有破坏作用。 2.脱蜡和水化 分别在二甲苯Ⅰ、Ⅱ中浸泡15~30分钟,以脱掉组织中的蜡。但是,进人组织中的二甲苯不能与水溶性染色液相溶,故需进一步通过下行梯度乙醇把组织中的二甲苯逐步替代出来。切片在100%乙醇工、Ⅱ中分别浸泡
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